Методическая разработка по подготовке лабораторного занятия №41 для студентов медицинского факультета Тема: Патогенные энтеробактерии.

Вид материала

Методическая разработка

Содержание 5. Краткая характеристика туляремии 1.трансмиссивный 2.воздушно-пылевой 3.контактный 5.алиментарный 1.Глазно-бубонная 2. Кожно-бубонная 3. Ангиноз-ная 4. Кишечная 5. Легочная 6.Первично-септичес-кая Стойкий, Длительный Антибактериальный Клеточный (ГЧЗТ) 6. Краткая характеристика псевдотуберкулеза и кишечного йерсиниоза 1.воспаление слизистой оболочки илео-цекального отдела 2. Мезаденит 3. Бактеремия 4. поражение внутренних органов, суставов и др Непродолжи-тельный Ненапряжен-ный Типоспецифический формируется состояние ГЧЗТ 1.4.2. Перечень теоретических вопросов. 1.4.3. Источники учебной информации. Бактериологическое исследование Материал для исследования Аллергическая проба с тулярином Бактериоскопический метод Биологический метод Серологический метод Ускоренные методы диагностики Схема микробиологической диагностики псевдотуберкулеза Бактериологический метод Серологический метод Биологическая проба ... Полное содержание

Подобный материал:

• План занятия: 10 00 Проверка готовности студентов к занятию (тестовый контроль, устный, 259.7kb.
• План занятия: 10 00 Проверка готовности студентов к занятию (тестовый контроль, устный, 128.17kb.
• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №11 для студентов, 777.95kb.
• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №31 для студентов, 622.65kb.
• Календарный план лекций по микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов, 23.61kb.
• Методическая разработка для преподавателей. Тема: (для студентов курса факультета), 103.03kb.
• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №21 для студентов, 595.87kb.
• Методическая разработка для проведения практического занятия со слушателями тема 16., 432.07kb.
• Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 42.2kb.
• Календарный план лекций по микробиологии для студентов 2 курса медицинского факультета, 12.99kb.

5. Краткая характеристика туляремии

Механизм и пути передачи заболевания	Источник инфекции	Патогенетические формы:	Основные клинические признаки	Иммунитет	Профилактика	Лабораторная диагностика
1.трансмиссивный 2.воздушно-пылевой 3.контактный 5.алиментарный	дикие, синантропные грызуны, насекомо-ядные (около 300 видов);	1.Глазно-бубонная 2. Кожно-бубонная 3. Ангиноз-ная 4. Кишечная 5. Легочная 6.Первично-септичес-кая	-первичный аффект в месте укуса клеща; интоксикация; -специфи-ческое воспаление регионарных лимфатичес-ких узлов (бубон); - понос (кишечная форма); -кашель, одышка; -симптомы ангины -конъюн-ктивит	Стойкий, Длительный Антибактериальный Клеточный (ГЧЗТ)	Специфичес-кая (только в постоянных очагах туляремии): Живая вакцина Гайского-Эльберта;	Ранняя: Аллергичес-кая проба
Переносчики - клещи						Основная: Биологичес-кая проба, Бактериологический метод Серологический метод

6. Краткая характеристика псевдотуберкулеза и кишечного йерсиниоза

Механизм и пути передачи заболевания	Источник инфекции	Стадии заболевания	Основные клинические признаки	Иммунитет	Профилактика	Лабораторная диагностика
Фекально-оральный алиментарный	Крупный рогатый скот, свиньи, собаки, коты, птицы, грызуны	1.воспаление слизистой оболочки илео-цекального отдела 2. Мезаденит 3. Бактеремия 4. поражение внутренних органов, суставов и др.	Интоксика-ция; -боли в правом подвздош-ной области; - понос; -повышен-ная темпера-тура; -артрит -сыпь -образование гранулем и микроабсцессов в печени, селезенке, легких, суставах	Непродолжи-тельный Ненапряжен-ный Типоспецифический формируется состояние ГЧЗТ	Неспецифическая	Бактериологический метод Серологический метод (исследование парных сывороток)
Факторы передачи - овощи, а также другие продукты, которые не проходят термической обработки перед употреблением

1.4.2. Перечень теоретических вопросов.

1. Биологические свойства возбудителя туляремии, особенности его выделения из исследуемого материала.

2. Патогенность возбудителя туляремии для человека, механизмы заражения, патогенез, иммунитет.

3. Методы лабораторной диагностики туляремии.

4. Биологическая характеристика возбудителя чумы и других патогенных для человека йерсиний.

5. Дифференциально-диагностические признаки возбудителей чумы, псевдотуберкулеза, кишечного йерсиниоза.

6. Эпидемиология, патогенез и иммунитет при заболеваниях, вызванных патогенными йерсиниями.

7. Методы микробиологической диагностики чумы.

8. Лабораторная диагностика йерсиниозов.

9. Специфическая профилактика и основные противоэпидемические мероприятия в очаге возникновения чумы и туляремии.

1.4.3. Источники учебной информации.

Литература (основная):

9. К.Д.Пяткин, Ю.С.Кривошеин. Микробиология, М., 1980. Стр. 279-284, 297-301.
   
10. В.Д.Тимаков.Микробиология, 1983. Стр.293, 296-297, 311-313.
    
11. А.И.Коротяев, С.А.Бабич. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, Санкт-Петерб.,2002. Стр.355-361, 364-367.
    
12. И.Л.Дикий, И.Ю.Холупяк, Н.С.Шевелева, М.Ю.Стегний. Микробиология, Харьков, 1999. Стр.247-250, 254-258.
    
13. Микробиология. Руководство к лабораторным занятиям. Под ред. И.Л.Дикого, Харьков, 1999. Стр.294-297, 301-304.
    
14. Л.Б.Борисов. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии, 1984. Стр.198-204.
    
15. Л.Б.Борисов. Медицинская микробиология, вирусология,иммунология, М., 2002. Стр.426-428.
    
16. Ю.С.Кривошеин. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, 1973. Стр.118-125.
    
17. М.Н.Лебедева. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. Г., 1973. Стр. 211-220.
    

Литература (дополнительная):

4. Словарь по микробиологии, вирусологии, иммунологии и инфекционным заболеваниям. Общая ред.. Г.К.Палий, К., 2004.
   
5. Б.Л.Черкасский. Особо опасные инфекции, М.: «Медицина», 1996. Стр.35-38, 44-50.
   
6. А.Н.Маянский. Микробиология для врачей, Н.Новгород: НГМА, 1999. Стр.176-180.
   
7. Лекционный материал.
   

5. Ориентировочная основа действия (ОДД)
   

Схема микробиологической диагностики туляремии

Методы диагностики для проведения в лабораториях особо-опасных инфекций	Методы лабораторной диагностики, которые можно проводить в обычных лабораториях
Биологический Бактериологический	Серологический Аллергический (ранняя)

Материал для исследования: пунктат из бубонов, гной из язв, конъюнктивы, кровь, мокрота, секционный материал.

Бактериологическое исследование :

- заражение белых мышей или морских свинок материалом от больного

- через 5-14 суток вскрытие погибших животных;

- микроскопическое исследование мазков-отпечатков внутренних органов, брюшного экссудата, пунктата лимфатических узлов (окраска по Грамму, Романовському-Гимзе).

- посев выше указанного материала на яично-желочную среду Маккоя-Чепина или на глюкозо-цистиновый кровяной агар Френсиса;

- идентификация выделенной культуры по морфологии, культуральным, биохимическим признакам и антигенной структурой (РА с видовой О-сывороткой).

Материал для исследования: сыворотка крови

Серологический метод

- ускоренный ориентировочный метод – кровяно-капельная реакция агглютинации

- РА (с 10-12 дня); диагностический титр 1:100

-РНГА (ранняя серологическая диагностика, ретроспективная, определение поствакцинального иммунитета); диагностический титр 1:1280

-непрямая РИФ (ретроспективная диагностика, состояние после вакцинации, диагностика заболевания); диагностический титр 1:400

Аллергическая проба с тулярином (ранняя диагностика) - положительная с 3-5 дня заболевания

Схема микробиологической диагностики чумы (проводят в специализированных лабораториях)

Материал для исследования: выделения из язвы, пунктат из бубона, кровь, фекалии, мокрота (зависит от формы инфекции); секционный материал

Бактериоскопический метод: (предварительная диагностика)

- мазок, окраска по Грамму

-мазок, окраска по Леффлеру

- прямая РИФ

Бактериологический метод:

-посев материала в флаконы с 50-100 мл МПБ, на МПА, на среду Туманского, цитратный дезоксихолевый агар

-исследование колоний через 10-12 ч., через 18-20ч. учет типичного роста в МПБ (мазок, окраска по Грамму, Леффлеру)

-пересев изолированных колоний на скошенный агар

-через 24 ч. идентификация чистой культуры:

-РА с диагностической О-сывороткой

- РП с диагностической К-сывороткой

- проба на фаголизабельность чумным бактериофагом (метод стекающей капли)

- определение сахаролитических свойств на средах Гисса (дифференциация йерсиний см.ниже)

Биологический метод

- заражение морских свинок или белых мышей (подкожно, внутрибрюшинно, накожно)

- исследование животных погибших через 2-3 дня (зараженные внутрибрюшинно) или через 5-7 дней:

-мазки из внутренних органов;

- высев крови на питательные среды, выделение чистой культуры, идентификация

Серологический метод (ретроспективная диагностика)

Материал для исследования: сыворотка крови

-РНГА; диагностический титр 1:40

Аллергическая проба с пестином (определение поствакцинального иммунитета, ретроспективная диагностика)

Ускоренные методы диагностики ( базируются на определении антигенов возбудителя в материале): -РИФ;

-РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом;

- реакция кольцепреципитации по типу Асколи;

- определение фаголизиса культуры противочумным бактериофагом.

Схема микробиологической диагностики псевдотуберкулеза

Материал для исследования: пунктат лимфатических узлов, смывы из носоглотки, кал, моча, желчь, рвотные массы

Бактериологический метод:

- посев материала на среды Эндо, Серова

-через 48-72 ч. подозрительные колонии микроскопируют, пересевают для накопления чистой культуры;

-идентификация:

Тест на подвижность при 25⁰С;

Определение сахаролитических свойств на средах Гисса;

Определение антигенной структуры в РА с группоспецифичными О-сыворотками

Серологический метод (из второй недели заболевания)

Материал для исследования: сыворотка крови

-РНГА; диагностический титр 1:400;

- РА; диагностический титр 1:200

-ИФА

Биологическая проба на морских свинках (гибнут через 7-12 суток)

Аллергическая кожная проба


Схема микробиологической диагностики кишечного йерсиниоза

Материал для исследования: кровь, фекалии, дуоденальное содержимое, моча, желчь, рвотные массы

Бактериологический метод:

- посев материала на среды Эндо, Плоскирева, селенитовый бульон, CIN-агар

- культивирование при 25⁰С; через 48-72 ч. подозрительные колонии микроскопируют, пересевают для накопления чистой культуры;

- идентификация:

Тест на подвижность при 25⁰С;

Определение сахаролитических свойств на средах Гисса;

Определение антигенной структуры в РА с групповыми О-сыворотками

Серологический метод (со второй недели заболевания): исследование парных сывороток в РНГА; РА; непрямой ИФА

Диагностический критерий - нарастание титра в 4 и более раз за 7-10 суток

Биологическая проба на морских свинках (гибнут через 7-12 суток)

Аллергическая кожная проба


Дифференционные признаки патогенных йерсиний

Тест	Y.pestis	Y. pseudotuberculosis	Y.enterocolitica.
Подвижность при 250С	-	+	+
Ферментация адонита	-	+	-
Ферментация рамнозы	-	+	-
Ферментация сахарозы	-	-	+
Лизис чумным фагом	+	-	-
Образование H2S	+	+	+
Плазмокоагулаза	+	-	-
Каталаза	+	+	+
Уреаза	-	+	+
Рост на цитратном дезоксbхолевом агаре	Красные колонии	Желтые колонии	Желтые колонии

1.7. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.

1.7.1. Методика проведения занятия.

1. Промикроскопировать демонстрационные препараты франциселл, патогенных йерсиний. Микроскопическую картину зарисовать.
   
2. Поставить реакцию кольцепреципитации по типу Ассколи с целью выявления туляремийного преципитиногена в исследуемом материале.
   
3. Провести учет демонстрационного опыта фаголизиса методом «стекающей капли», который используется для ускоренной диагностики чумы.
   
4. Учесть результаты развернутой РА с парными сыворотками больного туляремией в демонстрационном опыте, сделать выводы.
   
5. Учесть результаты РПГА с парными сыворотками больного и эритроцитарными диагностикумами йерсиний псевдотуберкулеза и энтероколита. Сделать выводы.
   
6. Изучить иммунобиологические препараты для диагностики и профилактики заболеваний, вызванных патогенными йерсиниями и франциселлами.
   
7. Ознакомиться с антибиотиками, которые используют для экстренной профилактики и этиотропного лечения чумы и туляремии.
   
8. Оформить протокол, сделать выводы.
   

2. Организационная структура проведения лабораторного занятия.
   

№ этапа	Этапы работы	Время мин..	Средства обучения	Оборудование	Место проведения
1.	Организационная часть	2	-	-	Учебная комната
2.	Проверка исходного уровня знаний: Устно по исходным вопросам Письменно - по тестам	5 5	Источника учебной информации Тесты на исходный уровень знаний-умений	-
3.	Инструктаж преподавателя по выполнению практической работы согласно методическим указаниям	5	Методическая разработка	-
4.	Самостоятельная работа студентов: микроскопирование мазков-препаратов патогенных йерсиний, франциселл внесение сведений в протокол; ознакомление с демонстрационными питательными средами, внесение сведений в протокол; учет демонстрационного опыта фаголизиса методом «стекающей капли» постановка реакции кольцепреципитации; учет результатов демонстрационной РА с парными сыворотками больного, внесение данных в протокол; учет результатов демонстрационной РНГА с парными сыворотками больных, внесение данных в протокол; ознакомление со схемами лабораторной диагностики чумы, туляремии, йерсиниозов; ознакомление с диагности-ческими и лечебно-профилактическими препара-тами, которые используют для лабораторной диагно-стики, профилактики и лечения инфекций, внесение данных в протокол оформление выводов к лабораторному занятию	10 5 5 5 5 5 10 10	Таблицы «Лабораторная диагностика чумы», «Лабораторная диагностика туляремии», алгоритм исследования	Мазки патогенных йерсиний, окрашенные по Грамму и Леффлеру; Мазки франциселл, окрашенные по Грамму; Микроскоп; Среды: МПА, Туманского Чашка с чистой культурой бактерий и нанесенным специфическим бактериофагом Преципитаций ни пробирки; Преципітиноген; Пипетки Штатив с демонстрацион-ной РА Планшет с демонстра-ционными РНГА Набор препаратов: диагно-стические сыворотки, люминесцентная специ-фическая сыворотка; бактериофаги, антибиотики
5.	Оценка работы каждого студента и проверка усвоения темы: письменно - по системе обучающих задач;	15	Система обучающих задач
6.	Подведение итогов занятия, задание для самостоятельной работы студентов при подготовке к следующей теме	3