Книги по разным темам
Pages: | 1 | ... | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | ... | 26 | для определения эффективности лечения ревматоидного артрита. Особенность метода сигма - СОЭ заключается в использовании гепанизированной венозной крови, предварительная стандартизация гематокрита (0,35 г/л) и четырехкратный учет величин седиментации эритроцитов с последующим подсчетом суммы полученных показателей. Благодаря унификации гематокрита отчетливо выявляется влияние на СОЭ различных ингридиентов плазмы: белков, липидов, мукополисахаридов, концентрации желчных кислот и желчных пигментов, что свидетельствует о динамичности метода сигма - СОЭ и, как показали исследования, увеличивает его диагностическую ценность. Однако данный метод является более трудоемким, чем метод Панченкова, т.к. требует предварительной стандартизации гематокрита.
Модификацией метода определения фракционной СОЭ является Способ контроля физиологического состояния человека, разработанный в ЗАО Центр Анализ веществ Воейковым В.Л., Гурфинкель Ю.И. и др. (патент RU 2103672 кл. G01N15/05, 1998).
Способ осуществляется следующим образом: при постановке теста используется микрометод в модификации Панченкова. Особенностью метода состоит в измерении времени прохождения границей эритроциты - плазмы заранее выбранных отрезков (например, 0,1, 0,5 или 1 мм), либо в фиксировании положения границы эритроциты - плазма через равные промежутки времени. Второй способ более просто поддается автоматизации. Такие измерения выявляют колебания скорости оседания эритроцитов в ходе измерения, картина которых более точно отражает физиологическое обследуемого. Прототипы данного метода не позволяют выявить подобных колебаний. На основании полученных измерений получают зависимость скорости осаждения эритроцитов от времени, характеризующуюся времени до начала колебаний скорости, частотой колебаний, максимальными значениями СОЭ, продолжительностью периода колебаний, которые является характеристичными для физиологического состояния обследуемого.
Данный способ контроля физиологического состояния позволяет повысить диагностическую ценность теста СОЭ путем получения дополнительной информации о физиологическом состоянии человека на основе анализа зависимости скорости оседания эритроцитов от времени измерения.
По мере углубленного изучения реакции оседания эритроцитов в динамике появилось ряд работ, исследующих зависимость различных характеров кривых оседания от физиологического состояния человека.
По мнению Л. Д. Штейнберга, кривые оседания более четко характеризуют понятие норма, чем скорость оседания эритроцитов за час. У здоровых людей, независимо от возраста, оседание происходит сравнительно равномерно, и кривая представляет собой несколько волнистую линию, приближающуюся к горизонтальной.
При наличии ряда патологических процессов максимум оседания, сопровождающийся выбуханием кривой, отмечается в начальные моменты реакции: кривая сдвигается влево.
Л. Д. Штейнберг различает четыре типы кривых оседания в зависимости от реактивности организма:
1) гиперреактивные, когда наиболее выражена величина оседания в первуювторую четверть часа; подобное явление наблюдается в острой фазе патологического процесса на фоне резко повышенной общей реактивности организма (ревматизм, крупозная пневмония);
2) реактивные, когда наиболее выражена скорость оседания во вторую или третью четверть часа; это имеет место при острых инфекционных заболеваниях, протекающих с достаточной реактивностью (тифы, скарлатина);
3) гипореактивные, когда максимум оседания происходит в четвертый - пятый отрезок времени; подобные кривые обнаруживаются у выздоравливающих больных или при заболеваниях, протекающих с пониженной реактивностью;
4) ареактивные плоские кривые со скоростью оседания за каждые 15 минут по 0,5 - 1 мм, они наблюдаются у больных, сопротивляемость которых резко снижена, при тяжелых общих процессах подобные кривые могут рассматриваться как прогностически плохой признак (финальная фаза туберкулезного менингита).
По мнению Г.И. Бурчинского, объединяющим принципом для различных типов кривых является не принадлежность кривой к тому или иному заболеванию, а характер процесса и общая величина за один час. Тип кривой зависит от общей величины оседания за первый час: сдвиг кривой влево тем больше выражен, чем больше скорость оседания в течение первого часа.
При большой скорости оседания, как правило, наблюдаются наибольшие выбухания в первую или вторую четверть первого часа; точно также, чем ниже оседание, тем равномернее выглядит кривая. При этом необходимо подчеркнуть, что при остро протекающих заболеваниях или обострениях хронических процессов чаще всего наблюдается максимальный подъем в первую или, реже, во вторую четверть первого часа, то есть сдвиг кривой влево характеризует острый характер течения процесса. Подобные кривые с выбуханием в первую четверть первого часа наблюдаются у больных в острой стадии ревматизма, при крупозной пневмонии, при нарастании эксудата в полости плевры, при острых лейкозах, при злокачественном малокровии на высоте заболевания.
По мере затихания процесса наблюдается сглаживание кривой, идущее параллельно уменьшению часовой скорости оседания; при этом нередко отмечается, что в то время как величина, характеризующая скорость оседания за час, еще не успевает значительно измениться, уже можно уловить изменение характера кривой: уменьшается разница оседания в первую и во вторую четверть первого часа, а иногда, наоборот, оседание во вторую четверть первого часа превышает оседание за первую четверть.
Наличие различных типов кривой оседания требует выяснения причин, которые обусловливают различный характер течения процесса оседания на протяжении первого часа. Существует мнение, что тип кривой оседания связан с накоплением в крови глобулина, являющегося полидисперсным белком, и с преобладанием в плазме той или иной его дисперсной фазы: превалирование грубодисперсного глобулина сопровождается выбуханием кривой в первые четверти первого часа; накопление глобулина с преобладанием частичек средней величины сопровождается выбуханием кривой в средней части, а глобулин, изобилующий мелкими частичками, обусловливает выбухание в конце кривой. Таким образом, кривая оседания является, в сущности, изображением дисперсного спектра глобулинов данной сыворотки.
Экспериментальные исследования показывают, что - если агломерация выражена резко, констатируется ясный сдвиг кривой влево с выбуханием ее либо в первую, либо во вторую четверть первого часа;
- если увеличение фибриногена в крови выражено значительно, почти всегда наблюдается выбухание кривой в первую четверть первого часа;
- в случаях, когда наблюдается одновременное увеличение фибриногена и глобулина и скорость оседания особенно высока, имеет место особенно резко выраженное выбухание кривой в первую, а также и во вторую четверть первого часа;
- в случаях, когда уровень глобулина резко повышен, а фибриноген увеличен в крови нерезко, наблюдается характерный сдвиг влево, но с максимумом оседания во вторую четверть первого часа.
- при нерезком увеличении содержания глобулина, при средних величинах ускорения наблюдается более равномерный тип кривой оседания.
Таким образом, тип кривой оседания эритроцитов, по-видимому, может быть связан с преобладанием в плазме крови тех или иных белковых фракций. Эти данные стоят в соответствии с изложенными выше взглядами на роль альбумина, глобулина и фиброгена в процессе оседания. С точки зрения коагуляционной теории оседания изменения в характере кривой, повидимому, могут рассматриваться как проявление явной и скрытой коагуляции (седиментации).
Таким образом, фракционная реакция оседания эритроцитов является более точным методом исследования, чем суммарная величина СОЭ за час и имеет большую диагностическую ценность и информативность. Анализ процесса оседания эритроцитов в динамике открывает новые возможности для экспресс-метода СОЭ. Однако вместе с этим повышается трудоемкость проведения анализа и требуется дополнительная обработка результатов исследования. Одним из рациональных решений является разработка методов автоматической регистрации и исследования процесса оседания эритроцитов в динамике.
2.6. Обзор методов и технических средств исследования агрегационных свойств клеток крови В настоящее время многие исследователи уделяют большое внимание изучению реологических свойств крови на уровне микроциркуляции, которые определяется ее агрегационными характеристиками. Для полного описа ния феномена агрегации необходимо определить адекватные характеристики агрегационного процесса, такие как 1. Время, необходимое для формирования дуплетов и сети монетных столбиков агрегатов эритроцитов;
2. Координатное число укрупненных агрегатов в единице объема;
3. Оценка факторов, вызывающих агрегацию.
В настоящее время ни один из методов не дает возможности определения всех трех параметров. В зависимости от используемой техники могут быть определены одновременно один либо два параметра. Исчерпывающую информацию об агрегационных способностях эритроцитов, таким образом, можно получить лишь используя по крайней мере две методики. Обычно используют две группы методов в зависимости от их способности производить либо статические, либо кинематические измерения.
Проведем классификацию методов гемореологических исследований, позволяющих определять агрегационные и реологические свойства крови.
2.6.1. Оценка агрегационных свойств крови по СОЭ Одним из самых широкоизвестных и доступных методов непрямого измерения агрегационных свойств крови является оценка скорости седиментации эритроцитов. В настоящее время в клинико-диагностических лабораториях применяется ручной метод определения скорости седиментации эритроцитов в вертикальной пробирке, при котором пробирку с исследуемой пробой помещают в аппарат Панченкова, и процесс оседания эритроцитов наблюдается визуально, а измерение величины СОЭ проводится через ограниченный промежуток времени - один час. Скорость падения сферы в жидкости по формуле Стокса прямо пропорциональна разности плотностей сферы и жидкости и квадрату радиуса шара и обратно пропорциональна вязкости жидкости. Измеряя показатель СОЭ и оценивая вязкость плазмы, соответствующее уравнение можно решить относительно эффективного диаметра агрегата. Однако скорость оседания сильно зависит от величины гематокрита и температурного фактора. Кроме этого, осаждение в вертикальной пробирке осуществляется при неконтролируемом напряжении сдвига, когда остаются неизвестными факторы образования и распада монетных столбиков агрегатов и значительную роль играет спонтанная агрегация, вызванная влиянием гравитационного поля. Данных недостатков лишен метод определения скорости оседания эритроцитов в наклонных пробирках, однако в виду несоответствия получаемых в этом случае результатов со стандартизированными значениями СОЭ, данный метод не нашел широкого применения. Модификацией анализа СОЭ является оценка скорости оседания эритроцитов в динамике - фракционное СОЭ. Этот метод более трудоемкий и требует дополнительных временных затрат со стороны исследователя. В этом случае одним из рациональных решений является использование методов автоматической регистрации и исследования процесса оседания эритроцитов в динамике.
Существует 3 автоматических метода исследования СОЭ в динамике:
1. Кондуктометрический метод;
2. Электрокинетический метод.
3. Фотометрический метод;
Кондуктометрический метод регистрации СОЭ основан на измерении сопротивления крови с постоянно оседающими эритроцитами. Электрический ток, проходящий через кровь, крайне мал - примерно 0,2 мА, напряжение 0,25 В, частота 10 кГц. Эритроциты при данной частоте практически является диэлектиками. Вследствие этого электрическое сопротивление крови между электродами при оседании эритроцитов на дно ячейки увеличивается, причем степень этого увеличения зависит от количества осевших эритроцитов. Электрическое сопротивление крови регистрируется в динамике и определяется как разность между сопротивлениями в данной точке (через 5, 10, 30 и 60 мин) и начальным сопротивлением крови. Однако исследования показали, что данный метод является менее чувствительным, чем ручной метод Панченкова. Кроме этого, кондуктометрический метод не позволяет оценивать агрегацию эритроцитов.
Разновидностью кондуктометрического метода является определение гематокритного числа по электропроводности крови. Принцип этого метода основан на различии удельного электрического сопротивления эритроцитов и плазмы крови на низких частотах тестового воздействия (до 25 кГц). При этом рост концентрации форменных элементов крови приводит к повышению удельного электрического сопротивления крови.
В основу электрокинетического метода исследования скорости оседания эритроцитов положен эффект Дорна. Он состоит в том, что при движении заряженных частиц в неподвижном столбе жидкости в ней возникает разность потенциалов. Известно, что одним из факторов, вызывающих агрегацию эритроцитов, является величина заряда мембраны. При ее увеличении возрастает способность эритроцита к агрегации. Измерение потенциала Дорна позволяет определить электрокинетическую характеристику оседания эритроцитов. Функциональная схема такого прибора представлена на рис. 1.7.
Рис. 1.7. Функциональная схема.
К седиментационному сосуд 1, в котором находится исследуемая суспензия эритроцитов 2, подведены отводящие электроды 3, подключенные ко входу электрометрического усилителя 4. Его входной сигнал поступает на согласующее устройство 5 и далее на регистратор 6. Седиментационный сосуд термостатируется термостатом 7. Вся измерительная часть тщательно экранируется от возможных электрических и магнитных наводок.
В эксперименте используется нативная кровь, разведенная в физиологическом растворе в соотношении 1:50, антикоагулянты при этом не применяются. Диаметр седиментационного сосуда 10 мм. Осаждение проводится в гравитационном поле Земли. Используются электроды второго класса: кольцевой, игольчатый и точечной формы. Плоскость их расположения в пространстве перпендикулярна вектору скорости осаждения эритроцитов. Расстояние между электродами составляло 10 мм. Температура проведения эксперимента 20 - 230. Для регистрации возникающей разности потенциалов используется электрометрический усилитель с высокоомным входом.
Pages: | 1 | ... | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | ... | 26 | Книги по разным темам