Для самостоятельного изучения Биохимия как наука. Этапы развития биохимии
| Вид материала | Методические рекомендации |
- Для самостоятельного изучения «Биохимия как наука. Этапы развития биохимии. Методы, 2115.87kb.
- Основы биохимии спорта, 1521.5kb.
- Тема строение белков и ферментативный катализ вопросы лекции, 137.02kb.
- Лекция №6. Структура биологии как науки. Ранние этапы эволюции жизни, 433.89kb.
- Тематический план лекций по общей биохимии для студентов 2-го курса лечебного, педиатрического, 1643.39kb.
- Резюмируя можно сказать, что объектом ее изучения являются химические элементы, 71.81kb.
- И темы рабочей программы самостоятельного изучения Перечень домашних заданий и других, 313.59kb.
- Т ч. для самостоятельного изучения и подготовки доклад, 35.86kb.
- Ы и темы рабочей программы самостоятельного изучения Перечень домашних заданий и других, 75.84kb.
- Календарно-тематический план лекций по физической и коллоидной химии для студентов, 67.53kb.
Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников:
Обязательная литература
1.Губський Ю.Г. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. - С. 18-36.
2. Практикум з біологічної хімії/ За ред.. проф.. Склярова О.Я. – Київ: Здоров’я, 2002. –
С. 14 – 24, 33 – 46.
3.Тестовые задания по биологической химии/ Под ред.Б.Г.Борзенко. -Донецк, 2000. -
С. 148- 202.
4.Лекции по биохимии.
5.Граф логической структуры (Приложение 1).
6.Инструкция к практическому занятию.
Дополнительная литература
1.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1998. - С. 19-74
2.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1990. - С. 17-63
3.Николаев А.Я. Биологическая химия. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 1998.-С.9-52
После изучения вышеперечисленных вопросов для самопроверки усвоения материала по изучаемой теме Вам предлагается решить следующие целевые обучающие задачи. Правильность решения задач можно проверить, сопоставив их с эталонами ответов.
^ Целевые обучающие задачи
Задача 1. Белок, состоящий из четырех субъединиц, обработали b-меркаптоэтанолом, восстанавливающим дисульфидные связи, что привело к утрате им физико-химических свойств. С чем связано это явление?
А. С потерей нативной структуры - денатурацией.
В. С разрушением только четвертичной структуры.
С. С утратой только третичной структуры.
D . С распадом только вторичной структуры.
E . С гидролизом пептидных связей.
Задача 2. Задняя доля нейрогипофиза человека секретирует 2 нейтропептида: вазопрессин и окситоцин, имеющие сходный состав, но обладающие различным биологическим действием.
Вазопрессин: цис-тир-фен-глн-асп-цис-про Антидиуретическое и сосудосужи- вающее действие
Окситоцин: цис-тир-изолей-глн-асп-цис-про Сокращение гладкой мускулатуры
Чем обусловлены значительные различия функции гормонов?
А. Составом и последовательностью аминокислот
В. Вторичной структурой
С. Третичной структурой
D. Изменением заряда
Е. Растворимостью
Задача 3. Больной 30 лет с обширными ожогами был доставлен в клинику. Из сыворотки крови был выделен аномальный белок (белок теплового шока). Каким методом можно идентифицировать первичную структуру этого белка?
А. Химическим
В. Ренгеноструктурного анализа
С. Электронной микроскопии
D. Электрофореза
Е. Ультрацентрифугирования
Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.
^ Эталоны ответов к решению целевых обучающих задач:
1 - А, 3 – А.
Краткие методические рекомендации к проведению занятия
В начале занятия проводятся тестовый контроль исходного уровня знаний студентов и его коррекция. Затем студенты приступают к выполнению лабораторной работы, используя при этом инструкцию.
После выполнения лабораторной работы необходимо оформить протокол, сделать выводы к работе, которые проверяет и контролирует преподаватель. Проводится анализ самостоятельной работы студентов и коррекция.
В конце занятия проходит итоговый контроль, подводятся итоги занятия.
^ Инструкция к практическому занятию
Работа №1 «Количественное определение белка биуретовым методом»
Принцип метода: Метод основан на способности пептидных связей белков образовывать с ионами Си+2 в щелочной среде соединение фиолетового цвета, интенсивность которого пропорциональна содержанию белков в растворе.
^ Материальное обеспечение: сыворотка крови, 3% раствор едкого натра, реактив Бенедикта, пипетки, пробирки, штативы, ФЭК.
Ход работы:
1. В пробирку налейте 1 мл сыворотки крови.
2. Добавьте 1 мл 3% №аОН и 0,2 мл реактива Бенедикта.
3. Раствор в пробирке перемешайте и оставьте на 15 минут.
4. Через 15 минут раствор фотоколориметрируйте на ФЭКе при зеленом светофильтре.
5. В тетрадь запишите оптическую плотность (Е) раствора .
6. Концентрацию белка в г/л определите по калибровочной кривой.
Нормальное содержание белка в сыворотке крови составляет 65-85 г/л.
Калибровочная кривая:
Е
С (г/л)
Результаты:
ВЫВОД:
^ Работа №2 «Доказательства белковой природы ферментов»
Используя цветные реакции, можно обнаружить присутствие белков в растворах и установить аминокислотный состав. Существует 2 типа цветных реакций:
- Универсальные на все белки (биуретовая и нингидриновая )
- Специфические на определенные аминокислоты (например, ксантопротеиновая – на ароматические аминокислоты)
^ Биуретовая реакция.
Принцип метода: Метод основан на способности пептидных связей белков образовывать с ионами Си+2 в щелочной среде соединение фиолетового цвета, интенсивность которого пропорциональна содержанию белков в растворе.
^ Материальное обеспечение: пробирки, пипетки, штатив, растворы белков, 3% раствор едкого натра, реактив Бенедикта.
Ход работы:
- Возьмите 3 прибирки.
В первую налейте 1 мл раствора яичного альбумина.
Во вторую налейте 1 мл раствора пепсина.
В третью налейте 1 мл раствора амилазы.
- Во все пробирки добавьте по 1 мл 3% рствора NаОН и по 0,2 мл реактива Бенедикта.
- Перемешайте и наблюдайте окраску.
Появление фиолетовой окраски в пробирках свидетельствует о наличии белка.
^ Нингидриновая реакция.
Принцип метода: ά – аминокислоты свободные , а также входящие в состав пептидов и белков при кипячении с водным раствором нингидрина дают комплексные соединения синего или сине-фиолетового цвета.
^ Материальное обеспечение: пробирки, пипетки, штатив, растворы белков, 0,5% раствор нингидрина.
Ход работы:
- Возьмите 3 прибирки.
В первую налейте 1 мл раствора яичного альбумина.
Во вторую налейте 1 мл раствора пепсина.
В третью налейте 1 мл раствора амилазы.
2. Во все пробирки добавьте по 0,5 мл 0,5% раствора нингидрина.
3. Осторожно прокипятите растворы в течение 1-2 минут и наблюдайте окраску.
Появление розово-фиолетового окрашивания, переходящего со временем в синее, свидетельствует о присутствии ά – аминокислот.
^ Ксантопротеиновая реакция.
Принцип метода: ароматические аминокислоты свободные, а также входящие в состав пептидов и белков при нагревании с азотной кислотой образуют нитросоединение желтого цвета, переходящего в оранжевый при добавлении щелочи.
^ Материальное обеспечение: пробирки, пипетки, штатив, растворы белков, концентрированная азотная кислота, 20% раствор едкого натра.
Ход работы:
- Возьмите 3 прибирки.
В первую налейте 1 мл раствора яичного альбумина.
Во вторую налейте 1 мл раствора пепсина.
В третью налейте 1 мл раствора амилазы.
2. Во все пробирки добавьте по 5 капель концентрированной азотной кислоты.
- Осторожно нагрейте растворы и наблюдайте окраску.
4. Охладите пробирки, добавьте по 0,5 мл 20% раствора NаОН и наблюдайте изменение окраски.
При наличии ароматических аминокислот появляется желтое окрашивание, которое после охлаждения раствора и добавления раствора едкого натра переходит в оранжевое.
Полученные результаты занесите в таблицу.
Результаты реакций:
| № пробирки | Исследуемый р-р | Окраска растворов в реакциях | ||
| биуретовой | нингидриновой | ксантопротеиновой | ||
| 1 | Яичный белок | | | |
| 2 | Пепсин | | | |
| 3 | амилаза | | | |
ВЫВОДЫ:
Подпиись преподавателя: