Функциональная и рецепторная характеристика белков суперсемейства иммуноглобулинов в процессе онто- и иммуногенеза у животных 16. 00. 03. Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Вид материала

Автореферат

Содержание Таблица 7. Показатели В-системы иммунитета у телят Примечание: p0,05, * - ЗС-РОК – CD19; **- ИПО; *** - РИД Динамика Ig и ILT-рецепторных клеток у стельных коров IgM-клетки периферической крови крупного рогатого скота, реакция иммунофлуоресценции (х600) Динамика иммунологических показателей у стельных коров

Подобный материал:

• Иммунный статус поросят при пневмонии, вызванной вирусом репродуктивно-респираторного, 398.05kb.
• Эпизоотологический мониторинг и иммунопрофилактика классической чумы свиней и болезни, 755.76kb.
• Совершенствование системы ветеринарно-профилактических мероприятий и её влияние, 471.82kb.
• Темы рефератов для поступления в аспирантуру по научной специальности 06. 02. 02 ветеринарная, 14.27kb.
• Кудряшова жанна Алексеевна Теоретические и практические аспекты новых подходов профилактики, 392.23kb.
• Оптимизация системы контроля эпизоотического процесса некробактериоза крупного рогатого, 1086.61kb.
• Программа вступительного экзамена в аспирантуру по специальной дисциплине 06. 02., 270.79kb.
• Получение и использование моноклональных антител в диагностике гриппа птиц 16. 00., 455.11kb.
• Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных, 301.79kb.
• Резервуары лиссавирусов на территориях, стационарно неблагополучных по бешенству 16., 223.09kb.

^

Таблица 7. Показатели В-системы иммунитета у телят

	В-лимфоциты (%)*	sIgM-клетки (%)**	Концентрация IgM (мг/мл) ***	Индекс IgM/В-клетки
Mm, n=15	12,00,5	19,20,8	0,920,03	0,0650,01

^ Примечание: p0,05, * - ЗС-РОК – CD19; **- ИПО; *** - РИД


Для повышения информативности иммунологических исследований в таб.5 приведен индексный показатель гуморальной системы телят по соотношению уровня IgM к количеству В-клеток. Согласно концепции Петрова Р.В. и соавт. (1995), постулирующей о взаимосвязи всех компонентов иммунной системы и изменение сбалансированности отдельных ее звеньев в условиях патологии, индексные показатели более адекватно отражают нарушения в иммунитете и повышают диагностическую значимость иммунологического мониторинга.

^ Динамика Ig и ILT-рецепторных клеток у стельных коров


Одной из важнейших проблем ветеринарной науки и практики является проблема профилактики бесплодия и получение жизнеспособного молодняка. Успешное ее решение основано на знании механизмов регуляции репродуктивной функции материнского организма в период плодоношения. Известно, что иммунная система организма во время беременности вместе с нервной и эндокринной системами определяет нормальное развитие плода и рождение здоровых телят. Поэтому оценка показателей иммунного статуса и изучение количественной динамики параметров иммунной системы стельных коров представляет значительный интерес как для характеристики взаимодействия между плацентой и иммунной системой, так и для разработки практических приемов коррекции воспроизводительной функции животных.

Опыт проводили на двух группах коров, изначально подобранных по принципу аналогов (n=20). Первая группа включала коров со сроком стельности 3-4 месяца, вторая – нестельных коров. Началом беременности у коров считали день последнего осеменения. Иммунологические исследования проводили двукратно с интервалом 2 месяца.

Поскольку в наших исследованиях на лабораторных животных установлено, что количество розеткообразующих клеток коррелирует с количеством CD2-лимфоцитов, определенных методом РИФ, на высоком уровне значимости (р<0,01), то на этом основании для количественного определения Т-клеток был использован метод розеткообразования (рис.10).




Рис.10. Т-клетки периферической крови крупного рогатого скот, реакция розеткообразования (х900)


Количество В-клеток определяли в РИФ. При постанове реакции 100 мкл взвеси МНК (0,5х10⁶кл/см³) периферической крови обрабатывали 1,0%-3,0% раствором лимонной кислоты, затем центрифугировали в РВS и инкубировали в блокирующем растворе. После отмывки клетки помещали на предметное стекло, высушивали и фиксировали в растворе ацетона с метиловым спиртом.


Рис.11. ^ IgM-клетки периферической крови крупного рогатого скота, реакция иммунофлуоресценции (х600)


Далее к фиксированным клеткам добавляли МкА к IgM рогатого скота (1:100). В качестве контроля на предметные стекла вместо МкА вносили 1%-ный раствор БСА. Клетки инкубировали, отмывали в PBS и добавляли FITC-конъюгат (НПЦ «МедБиоСпектр»). После инкубации и отмывки препараты просматривали под микроскопом (х600), используя 50% раствор глицерина в качестве иммерсионной среды. Учитывали светящиеся клетки в течение 24 часов после постановки реакции (рис.11).

Уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови определяли методом РИД.

Результаты комплексных исследований приведены в табл.8.

Таблица 8. ^ Динамика иммунологических показателей у стельных коров

Показатели	Группы животных
1	2	Контроль - 1	Контроль - 2
Т-клетки,% абс.(х109/л)	32,6±1,1 1,7±0,1	42,8±2,5 2,8±0,3	28,6±2,1 1,8±0,09	31,0±3,2 1,6±0,05
В-лимфоциты,% абс.(х109/л)	26,8±4,5 1,0±0,2	29,2±1,9 1,5±0,3	25,3±2,6 0,97±0,5	26,2±2,0 1,0±0,7
IgM мг/мл	2,3±0,4	3,5±0,5	2,3±0,1	3,1±0,4
IgGмг/мл	21,6±1,0	26,0±1,6	19,7±2,2	20,7±3,3
IgAмг/мл	0,75±0,3	0,8±0,2	1,0±0,5	1,3±0,6

Примечание. p 0,05. 1 – группа коров со сроком стельности 3-4 мес., 2 - группа коров со сроком стельности 5-6 мес. Контроль 1 и 2 – средние показатели нестельных коров с интервалом 2 мес.

Системные изменения иммунитета при стельности, в первую очередь, зависят от продукции гормонов и от иммунорегуляторного влияния плаценты. При десмохориальном типе плаценты, с увеличением срока стельности у коров, эпителий ворсин и крипт слущивается, кровеносная система плода отделена от сосудов матери только соединительной тканью, что сказывается на функционировании плацентарного барьера. Благодаря такому строению, плацента коров не пропускает через клеточные слои из крови матери молекулы Ig, которые передаются теленку постнатально с молозивом.

Анализ данных, приведенных в табл.6, свидетельствует о том, что в крови коров в период с 3-4 мес. до 5-6 мес. стельности увеличивается уровень IgG, которые путем транссудации поступают в молочную железу и постнатально с молозивом передаются теленку. В передаче IgG из крови в молочную железу особая роль принадлежит Fc-рецепторам на поверхности эпителиальных клеток, а трансэпителиальный переход IgG в молочную железу достигает максимального значения за 2-3 недели до отела. В эти же сроки у стельных коров повысилось как относительное, так и абсолютное количество Е-РОК в периферической крови. Данная тенденция наблюдалась также в контрольной группе, но была менее выражена. Одновременно зарегистрировано незначительное повышение относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов, по-видимому, связанное с увеличением содержания иммуноглобулинов в периферической крови стельных коров.

Иммунная толерантность при беременности обусловлена продукцией блокирующих антител, вызывающих модуляцию иммунного ответа. Клеточные рецепторы для IgG – FcγR, экспрессируют макрофаги, НК-клетки, некоторые Т-клетки и нейтрофилы. Мономерный IgG связываясь с Fc-рецепторами иммунокомпетентных клеток может изменять их биологическую активность. Возможно, что увеличение в крови стельных коров концентрации IgG обусловлено выполнением им функции антител, участвующих в супрессии иммунного ответа на антигены плода.

Необходимо отметить, что в оценке функциональных возможностей иммунной системы играют важную роль корреляционные взаимосвязи. Положительная корреляция уровня ранних (IgM) и поздних (IgG) иммуноглобулинов, является критерием нормального функционирования иммунной системы и ее адаптивных возможностей, как в норме, так и при различных физиологических состояниях, в том числе при беременности (табл.9).