Особенности этиопатогенеза, диагностики, терапии и профилактики мастита коров в сухостойный период 06. 02. 06 Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

Вид материала

Автореферат диссертации

Содержание Полянцев Николай Иванович Бочкарев Виталий Николаевич 1. Общая характеристика работы 1.2. Цель и задачи исследований. 1.3. Объекты исследований. 1.4. Предмет исследований. 1.5. Научная новизна. 1.6. Практическая значимость. 1.7. Апробация и реализация материалов работы. 1.9. Объем и структура диссертации. 1.10. Основные положения, выносимые на защиту. Материал и методы исследований 3. Результаты собственных исследований 3.2. Синдроматика и дифференциальная диагностика постлактационного клинически выраженного мастита Состав и свойства секрета вымени сухостойных коров Цитоморфологическая характеристика секрета вымени сухостойных коров в норме и при субклиническом мастите 3.4. Разработка и экспериментальная оценка цитологического 3.5. Микроанатомические изменения в молочной железе 3.6. Течение и исходы мастита сухостойных коров Мастит сухостойных коров как этиологический фактор ... Полное содержание

Подобный материал:

• Воспроизводительная функция у высокопродуктивных коров при нарушении обмена веществ, 814.36kb.
• Диагностика и органосохраняющая терапия при пиометре у сук 16. 00. 07- ветеринарное, 436.56kb.
• Диагностика и терапия послеродовых эндометритов у коров, вызванных haemophilus somnus, 306.61kb.
• Программа-минимум кандидатского экзамена по специальности 16. 00. 07 Ветеринарное акушерство, 125.04kb.
• Сравнительная оценка полихимиотерапевтического метода лечения неоплазий молочных желёз, 489.14kb.
• Применение электромагнитного излучения крайне высокой частоты и препарата гентодиамаст, 358.4kb.
• Программа курса «Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных», 86.79kb.
• Влияние иммуномодулятора «миелопид» илазерного облучения молочной железы свиноматок, 348.3kb.
• Особенности кормления коров в сухостойный период Автор: Галецкий В. Б.,, 52.59kb.
•      Впоследние 15-20 лет большое внимание уделяется совершенствованию нормированного, 512.91kb.

На правах рукописи


Роман Лилия Григорьевна


ОСОБЕННОСТИ ЭТИОПАТОГЕНЕЗА, ДИАГНОСТИКИ,

ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ МАСТИТА КОРОВ

В СУХОСТОЙНЫЙ ПЕРИОД


06.02.06 – Ветеринарное акушерство и биотехника

репродукции животных


Автореферат диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук


Саратов – 2010

Работа выполнена на кафедре акушерства и хирургии в ФГОУ ВПО «Донской государственный аграрный университет» и сельхозпредприятиях

Одесской области (Украина)


Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор

Полянцев Николай Иванович


Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Семиволос Александр Мефодьевич

доктор ветеринарных наук, профессор

Бочкарев Виталий Николаевич

доктор ветеринарных наук, доцент

Конопельцев Игорь Геннадьевич


Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Пермская государственная сельскохозяйственная академия им. Д.Н. Прянишникова»


Защита состоится 24 сентября 2010 г. в 10⁰⁰ часов на заседании диссертационного совета Д 220. 061.01 при ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ» по адресу 410005, РФ г. Саратов, ул. Соколовая, 335.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ».


Автореферат разослан «___» __________2010 года


Отзывы направлять по адресу: 410012, Саратов, Театральная пл., 1, ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ», Диссертационный совет Д 220. 061.01


Ученый секретарь

диссертационного совета И. Ю. Домницкий


1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Процветающее сельское хозяйство было во все времена и поныне остается важнейшим источником благосостояния населения, гарантом продовольственной независимости государства.

В период обретения Украиной государственного суверенитета, формирования рыночных отношений не удалось избежать разрушительных тенденций в сельском хозяйстве. Наиболее болезненно это сказалось на животноводческой отрасли, прежде всего молочном скотоводстве. Достаточно сказать, что за сравнительно короткий исторический срок (1990-2005 г г.) дойное стадо сократилось с 10,7 до 3,7 млн голов, а производство молока снизилось до уровня 1953 года.

Негативная тенденция состоит и в том, что преобладающая часть поголовья (около 77%) ныне находится на личных подворьях граждан. Это тупиковый путь, поскольку означает возврат к натуральному хозяйству. Его можно преодолеть лишь созданием на альтернативной основе крупных высокоспециализированных хозяйств акционерного типа, способных в полной мере использовать инновационные технологии мирового уровня.

Наглядным примером может служить деятельность базового хозяйства Министерства аграрной политики Украины в области животноводства – АОЗТ «Агросоюз» (Днепропетровская область), созданного в 1996 г. За истекшее десятилетие инновационные технологии производства и управления дали ожидаемые результаты (высокая производительность труда, низкая себестоимость продукции). На перспективу численность дойного стада намечено увеличить с 770 до 5000 голов, а также построить и ввести в эксплуатацию комплекс по выращиванию ремонтных телок на 6000 голов.

Индустриальные технологии в молочном скотоводстве предполагают неизмеримо более высокий уровень ветеринарного обслуживания поголовья. В этих условиях особую актуальность приобретает сохранение здоровья молочной железы, поскольку в условиях интенсивной эксплуатации, усугубляемой воздействием техногенных факторов, данный орган весьма уязвим для болезнетворных микроорганизмов. С другой стороны, беспривязное содержание поголовья, при наличии динамичных технологических групп, усложняет задачу обнаружения больных животных, оказание им квалифицированной лечебной помощи. Не случайно на некоторых молочных комплексах введена должность врача-маммолога.

В системе противомаститных мероприятий весьма слабым звеном остается отсутствие достаточно простых и надежных методов обнаружения субклинического мастита в постлактационный период. Их разработке должно предшествовать углубленное изучение постлактационных изменений в молочной железе, с использованием клинических, гистоморфологических, цитологических, биохимических методов исследования.

Санация молочной железы коров вслед за прекращением доения пролонгированными антибиотикосодержащими препаратами, изготовляемыми по формуле DC, снискала большую популярность за рубежом, однако механический ее перенос в наши условия неоправдан как с экономической, так и с лечебно-профилактической точек зрения.

Не вскрыта в должной мере этиологическая связь желудочно-кишечной патологии новорожденных телят с неизлеченным маститом коров-матерей.

1.2. Цель и задачи исследований. Основная цель исследований – разработать комплекс диагностических, лечебных, профилактических мероприятий при постлактационном мастите высокопродуктивных коров.

Комплексная программа исследований предусматривала решение следующих конкретных задач.

1. Изучить характер и интенсивность морфологических изменений в молочной железе коров после завершения лактации в норме и при субклиническом мастите, и на этой основе разработать визуальный экспресс-метод его диагностики.
   
2. Научно обосновать и доказать возможность применения цитологического метода диагностики субклинического мастита в постлактационный период с использованием поверхностно-активных веществ.
   
3. Изучить распространение мастита (клинически выраженного и скрытого) среди коров группы сухостоя.
   
4. Вскрыть особенности этиологии, клинического проявления, течения и исходов мастита в постлактационный период.
   
5. Изучить биохимический и цитоморфологический состав секрета вымени сухостойных коров; на основе полученных данных разработать биохимический экспресс-метод и люминесцентно- микроскопический метод диагностики субклинического мастита.
   
6. Дать терапевтическую и экономическую оценку при мастите сухостойных коров йодсодержащих препаратов: йодмастагеля, ПИВС.
   
7. Разработать рецептуру и технологический регламент изготовления пленочно-антисептического покрытия (ПАП), изучить в сравнительном аспекте результативность его применения для предупреждения новых случаев мастита в дегенеративную фазу сухостоя.
   
8. Научно обосновать выбор сроков проведения диагностической и лечебной работы при мастите сухостойных коров, обеспечивающий сохранность молочной продуктивности в очередную лактацию и биологическую полноценность молозива.
   

1.3. Объекты исследований. Коровы красной степной породы, помеси от поглотительного скрещивания их с черно-пестрыми голштинами, а также чистопородные голштины отечественной и зарубежной селекции.

1.4. Предмет исследований. Определение особенностей этиологии и патогенеза, принципов диагностики, терапии и профилактики мастита коров в сухостойный период.

1.5. Научная новизна. В результате проведенных исследований:

• изучены в динамике органолептические признаки секрета вымени сухостойных коров, на основе полученных данных разработан экспресс-метод диагностики субклинического мастита;
  
• установлена возможность диагностики субклинического мастита в любой срок сухостоя антитрипсиновым тестом в нашей модификации;
  
• изучен биохимический состав секрета вымени сухостойных коров, а также молозива в норме и при субклиническом мастите;
  
• подтверждена возможность использования поверхностно-активных веществ при экспресс-диагностике субклинического мастита; для этих целей предложено использовать жидкое моющее средство «Прогресс» в разведении 1:14;
  
• на основании данных визуальной оценки секрета и результатов исследования тканевых образцов установлено, что при субклиническом мастите сухостойных коров происходит задержка на 2-3 нед инволюции паренхимы молочной железы;
  
• выяснена терапевтическая эффективность при мастите коров (клинически выраженном и субклиническом) в период сухостоя йодвисмутсодержащих препаратов йодмастагеля и ПИВС;
  
• вскрыта этиологическая роль мастита сухостойных коров (включая субклинический) в возникновении диареи новорожденных телят;
  
• изучен биохимический состав, иммунологические свойства и санитарное качество молозива коров, перенесших мастит в сухостойный период;
  
• создано пленочно-антисептическое покрытие (ПАП), содержащее в своем составе биологически активный йод и биополимер, разработаны рекомендации по его применению на сухостойных коровах с целью профилактики мастита.
  

1.6. Практическая значимость. Предложены простые, относительно дешевые, высокочувствительные экспресс-методы диагностики субклинического мастита у коров в постлактационный период: визуальный, цитологический.

Предложен йодсодержащий препарат йодмастагель в качестве средства монотерапии при мастите сухостойных коров (субклиническом и клинически выраженном).

Определены рациональные сроки проведения противомаститных мероприятий в постлактационный период.

1.7. Апробация и реализация материалов работы. Материалы диссертации доложены и получили одобрение: на Всесоюзной научной конференции «Научные основы профилактики и лечения патологии воспроизводительной функции сельскохозяйственных животных» (Воронеж, 1988); на научной конференции «Повышение продуктивности и совершенствование мер борьбы с болезнями животных в условиях промышленного животноводства и мелкотоварных хозяйств (Харьков, 1991);

на Международной научно-практической конференции «Современные тенденции развития агропромышленного комплекса» (Россия, п. Персиановский, 2006); на Международной научно-производственной конференции «Проблемы экологии ветеринарной медицины Житомирщины» (Украина, Житомир, 2005); на Международной научно-производственной конференции «Научное и кадровое обеспечение ветеринарного благополучия животноводства» (Одесса, 2008); 1-й международной научно-практической конференции Кубанского ГАУ (Краснодар, 2009); V научно-практической конференции «Современные проблемы общей патологии в ветеринарной медицине» (Сумы, 2009); на научных конференциях Одесского университета (2005, 2006, 2008 гг.); на научных конференциях Одесского института агропромышленного производства (2004, 2005, 2006 гг.).

1.8. Публикации. По материалам представленной к защите диссертации опубликовано 30 работ, в том числе в 7 изданиях, рецензируемых ВАК.

1.9. Объем и структура диссертации. Диссертация имеет объем 256 страниц в компьютерном исполнении. Состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложений для практики, библиографического списка, включающего 327 наименований (в том числе 146 иностранных), приложения.

1.10. Основные положения, выносимые на защиту. На защиту выносятся:

• визуальный и цитологический методы диагностики субклинического мастита у коров, находящихся в сухостое;
  

• влияние мастита сухостойного периода на состав и свойства молозива, заболеваемость новорожденных телят диспепсией;
  
• применение йодмастагеля и ПИВС при клинически выраженном и субклиническом мастите сухостойных коров;
  
• использование пленочно-антисептического покрытия (ПАП) для профилактики мастита у коров в дегенеративную фазу постлактационной инволюции молочной железы.
  

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
   

Экспериментальную часть диссертационной работы выполняли на базе СООО «Агрофирма Нива», СООО «Агрофирма Петродолинское» Овидиопольского района и СПК «Родина» Саратского района Одесской области, Одесской областной лаборатории ветеринарной медицины, кафедры зоогигиены и общего животноводства Одесского госагроуниверситета, кафедр акушерства и хирургии, биохимии и биохимической лаборатории Донского госагроуниверситета (РФ, Ростовская область).

Общая схема исследований представлена на рис.1.

На начальном этапе ставилась задача разработать визуальный экспресс-метод диагностики скрытого мастита у коров, находящихся в сухостое. Для этого предварительно (за 7-10 сут до начала запуска) обследовали на скрытый мастит мастидиновым тестом 137 коров.

Объекты исследований

(сухостойные коровы)

здоровые

больные субклиническим маститом

больные клиническим маститом


диагностика

Органолепти-ческая характеристика секрета вымени

Цитоморфо-логическая характери-стика секрета вымени

Люмине-сцентно-микроскопи-ческая характеристика секрета вымени

Биохимии-ческая характери-стика секрета вымени

Гистологи-ческая характери-стика паренхимы вымени

диагностика

Люмине-сцентно-микроскопи-ческая характери-стика секрета вымени


Органо-лептическая характери-стика секрета вымени


Гистологи-ческая характери-стика паренхимы вымени


терапия

йодмастагель

полимерйодвисмутсульфамид

мастисан А - форте

фармакопрофилактика

плёночно – антисептическое покрытие

нафпензал DC

биоспорин

Рисунок 1. Общая схема исследований



Для постановки опыта отобрали 38 коров, давших четкую положительную тест-реакцию на диагностикум. С целью подтверждения диагноза спустя 7 сут секрет вымени этих животных исследовали бактериологическим методом. Основываясь на бактериологических данных (обнаружение патогенных штаммов микроорганизмов), отобрали 31 корову с поражением 1-2 долей, причем с таким расчетом, чтобы смежные (контрольные) доли были здоровыми. В дальнейшем через каждые 10 сут из больных и смежных здоровых долей отбирали пробы секрета для органолептической оценки по признакам: объем, цвет, консистенция, клейкость, однородность, прозрачность, опалесценция.

На 30-й день сухостоя от 25 подопытных коров с четко выраженными различиями по органолептическим признакам взяли пробы секрета для бакисследования. Его проводили по методике ВНИИ фармакологии, патологии и терапии животных (В.А.Париков, В.И.Слободяник, Г.Н.Кузьмин и др., 1981).

Параллельно на группе из 8 сухостойных коров исследовали в динамике секрет здоровых и пораженных субклиническим маститом долей вымени по ряду биохимических показателей (общий и растворимый белок, лактоза, гликопротеиды, сиаловые кислоты, n-ацетил-ß-D-глюкозаминидаза, ДНК, РНК, α₁-антитрипсин).

Влияние субклинического мастита на гистоструктуру паренхимы вымени изучали на биопсийном материале, который получали с помощью биотома конструкции М.Г. Миролюбова (1975) в середине сухостоя. Из 10 тканевых образцов изготовили 50 гистопрепаратов. При их микроскопии выясняли состояние железистого эпителия и межальвеолярной соединительной ткани, кровеносных сосудов, выводных протоков.

Цитологическим исследованием секрета вымени было охвачено 14 сухостойных коров; помимо определения общего числа лейкоцитов по Прескотту-Бриду проводили дифференцированный подсчет числа живых и мертвых клеток люминесцентно-микроскопическим методом (в нашей модификации). Полученные данные послужили научной основой для разработки цитологического экспресс-метода диагностики субклинического мастита в сухостойный период. В качестве реагента избрали жидкое моющее средство «Прогресс» М-20 производства Новочеркасского завода синтетических продуктов. Испытали различные разведения жидкости «Прогресс». Разведение, давшее наибольшее число совпадений с эталонным (прямой подсчет лейкоцитов в секрете) апробировали на 40 животных; базой для сравнения служил импортный экспресс-диагностикум Profilacreagent.

С помощью предложенных нами экспресс-методов (визуальный, цитологический) в трех сельхозпредприятиях Одесской области провели всесторонний анализ заболеваемости сухостойных коров маститом. Наряду с изучением динамики и частоты мастита регистрировали исходы болезни, выясняли этиологическую роль неизлеченного мастита сухостойного периода в возникновении послеродовых осложнений у коров-матерей, желудочно-кишечной патологии у новорожденных телят.

В дальнейшем ставили задачей экспериментально подтвердить этиологическую связь желудочно-кишечной патологии у новорожденных телят с постлактационным маститом коров-матерей.

Под наблюдением находилось 3 группы телят, родившихся от коров: 1 - со здоровым выменем; 2 – больных маститом (клинически выраженным или субклиническим); 3 – прошедших курсовое лечение по поводу мастита до отела. Учитывали частоту, тяжесть, исход болезни.

Клинические данные были дополнены оценкой молозива от коров-матерей по биологической полноценности и санитарному состоянию. Пробы для исследования отбирали при первом доении и на пятые сутки после отела.

Следующим шагом было создание неантибиотического противомаститного препарата с последующей оценкой его терапевтической эффективности при мастите в сухостойный период.

Следуя рабочей концепции, в качестве активного компонента использовали йодвисмутсульфамид нового поколения, лекарственной основы - гидрогель, целевой продукт назван йодмастагелем.

По завершении разработки технологического регламента изготовления йодмастагеля провели цикл исследований по оценке физической и химической стабильности йодмастагеля при различных условиях хранения, специфической активности, безвредности при внутрицистернальном введении.

Положительные результаты лабораторных исследований позволили приступить к клиническим испытаниям препарата. Данный этап начали с определения экспериментальным путем разовой терапевтической дозы йодмастагеля при субклиническом мастите нелактирующих коров, для чего заложили научно-хозяйственный опыт.

Схема опыта

Группа	n	Лечение
1	15	Йодмастагель внутрицистернально дважды, с 48-часовым интервалом, разовая доза 5,0 мл
2	15	Йодмастагель внутрицистернально дважды, с 48-часовым интервалом, разовая доза 10,0 мл
3	15	Йодмастагель внутрицистернально дважды, с 48-часовым интервалом, разовая доза 15,0 мл

При оценке эффективности лечения ориентировались на показания тест-реакции секрета леченной доли с индикатором мастита «Дон-2», а также на органолептические данные.

Помимо этого, определили кратность введения йодмастагеля путем постановки опыта на 45 сухостойных коровах с диагнозом “субклинический мастит”. Сформировали 3 уравненные группы: 1-я – йодмастагель в оптимальной дозе (10 мл) однократно; 2-я – йодмастагель в дозе 10 мл дважды, интервал 48 часов; 3-я – йодмастагель в дозе 10 мл трижды, с 48-часовым интервалом.

Параллельно сопоставили эффективность двух способов применения йодмастагеля: внутрицистернального и трансдермального. Внутрицистернально препарат вводили по оптимальному варианту. Трансдермальный способ состоял в нанесении йодмастагеля на чистую, хорошо увлажненную кожную поверхность пораженной доли вымени; такое лечение повторяли через 48 часов.

Сравнительная оценка терапевтической и экономической эффективности применения йодмастагеля при мастите сухостойных коров проведена на молочной ферме ООО «А/ф Петродолинское» в 2006 г. Базой для сравнения служили мастисан А-форте и ПИВС. Для подтверждения экспериментальных данных организовали производственную апробацию йодмастагеля на трех сельхозпредприятиях Одесской области. По результатам апробации оформлены акты внедрения.

Итоговые данные представлены в актах внедрения.

Заключительный этап НИР состоял в разработке, всестороннем изучении и производственной апробации средства для профилактики мастита у коров после их перевода в сухостой – пленочно-антисептического покрытия (ПАП). Параллельно испытывалось биологическое средство защиты молочной железы от патогенов – биоспорин.

При разработке рецептуры ПАП использовали относительно дешевые и доступные ингредиенты: ПИВС, формалин, мочевину, глицерин, поливинилпирролидон. В процессе научного поиска были определены оптимальное их соотношение, температурные параметры на различных стадиях технологического процесса, последовательность технологических операций.

После отработки рецептуры и технологического регламента изготовления ПАП провели на шести клинически здоровых нелактирующих коровах оценку его пленкообразующей и пенетрирующей способности при нанесении на кожную поверхность сосков.

Вслед за этим изучили влияние ПАП (при накожной аппликации) на микробное число в секрете вымени сухостойных коров.

Затем провели сравнительную оценку защитных свойств ПАП на производственном поголовье. Из числа коров с завершившейся лактацией сформировали четыре группы, в каждую включили 50 голов: 1-я – двукратная, с недельным интервалом, обработка кожи сосков ПАП; 2-я – однократное внутрицистернальное введение нафпензала DC; 3-я – биоспорин внутрицистернально из расчета 10 млрд живых бактерий-симбионтов, суспензированных в 5,0 мл физиологического раствора; 4-я – без применения средств фармако- и биопрофилактики.

У всех подопытных животных на 15-е и 30-е сутки сухостоя провели оценку состояния долей вымени визуальным и пальпаторным путем. Затем отбирали в лунку молочно-контрольной пластины пробы секрета (отдельно из каждой доли); их оценивали по органолептическим признакам с последующей постановкой тест-реакции на субклинический мастит индикатором «Дон-2».

Основываясь на результатах проведенных исследований, выяснили по каждой группе процент заболевших субклиническим и отдельно - клиническим маститом; помимо этого, определена сумма затрат на профилактическую обработку вымени сухостойных коров каждым из перечисленных средств.

Экспериментальный способ в дальнейшем прошел производственную апробацию (с оформлением актов внедрения) в трех сельхозпредприятиях Одесской области.