Дедкова лариса Александровна научное обоснование спектрофотометрических методов определения цианидов для токсикологических и гигиенических исследований

Вид материала

Автореферат

Содержание Научный руководитель Хамуев Геннадий Дмитриевич Общая характеристика работы Цель исследования Научная новизна работы Практическая значимость работы Основные положения, выносимые на защиту Апробация результатов исследований Личный вклад автора Структура и объём диссертации Содержание работы Результаты исследований Изучаемое действие цианида калия Список публикаций по теме диссертации

Подобный материал:

• Новая методология прогнозирования развития, 273.94kb.
• Лучкевич Владимир Станиславович Доктор медицинских наук, профессор Кочорова Лариса, 358.38kb.
• Учебник, 9611.43kb.
• Обоснование и разработка методов изучения структурных особенностей углей для определения, 494.44kb.
• Учебная программа дисциплины Методология и методы психолого-педагогических исследований, 490.85kb.
• Использованные источники информации, 201.36kb.
• Целевая программа «Развитие научного потенциала высшей школы (2006-2008 годы)» Мероприятие, 311.58kb.
• Этот старинный метод получил в наше время свое второе рождение и научное обоснование, 51.3kb.
• Петушкова Надежда Викторовна 2009 2010 г пояснительная записка, 72.08kb.
• Кряжева Лариса Александровна, учитель географии высшей квалификационной категории моу, 41.61kb.

на правах рукописи

ДЕДКОВА

Лариса Александровна


НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИАНИДОВ ДЛЯ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ


14.00.07 − гигиена


АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Иркутск − 2009


Работа выполнена в Ангарском филиале − НИИ медицины труда и экологии

человека ГУ Научный центр медицинской экологии ВСНЦ СО РАМН

Научный руководитель:

доктор биологических наук,

профессор Дорогова Варвара Борисовна


Научный консультант:

кандидат медицинских наук Хамуев Геннадий Дмитриевич

Официальные оппоненты:

кандидат медицинских наук,

доцент Жукова

Елена Викторовна

доктор биологических наук Дьякович

Марина Пинхасовна

Ведущая организация:

ГОУ ДПО «Иркутский государственный институт усовершенствования врачей» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию

Защита состоится « 20 » марта 2009 г. в 11 часов на заседании

Диссертационного совета Д.208.032.02 ГОУ ВПО «Иркутский государственный медицинский университет» по адресу: 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 3.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Иркутский государственный медицинский университет».


Автореферат разослан « 19 » февраля 2009 г.


Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор медицинских наук,

профессор Лемешевская Е.П.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования

Особенности ионообменной технологии извлечения золота из руды обусловливают контакт работников с цианидами, так как основным технологическим реагентом при ионообменном процессе извлечения золота из руды является цианплав. Его раствор представляет собой слабую синильную кислоту, которая выделяется в воздух производственных помещений в виде цианистого водорода, являющегося основным неблагоприятным химическим фактором (Лодейщиков В.В. с соавт., 1971; Лутай А.В. с соавт., 1974; Рукавишников В.С. с соавт., 1980). Концентрации цианистого водорода могут изменяться в значительных пределах в зависимости от времени года, состояния технологического оборудования, условия ведения технологического процесса, в ходе которого может меняться температура и щелочность цианистой пульпы, концентрация в ней цианидов (Рукавишников В.С. с соавт., 2000). В тоже время остаются не изученными особенности формирования газовой фазы синильной кислоты в зависимости от ионного состава жидкой цианистой пульпы.

В условиях ведения технологического процесса, ряд производственных операций осуществляется с использованием ручного труда, что приводит к контакту кожных покровов рабочих с цианистыми растворами пульпы. В тоже время до сих пор не установлен предельно допустимый уровень загрязнения кожных покровов (ПДУ_зкп) цианистыми соединениями, хотя встречаются работы, указывающие на проникновение цианистых соединений в эксперименте через кожу, вплоть до летального исхода (Долгов Л.В. с соавт., 1961; Лазарев Н.В., 1977). Кроме того, отсутствует научно обоснованный, оперативный, применимый для исследований в натурных условиях метод определения цианидов в смывах с кожных покровов.

Попадая в организм теплокровных животных и человека цианистые соединения, независимо от пути поступления, переходят в менее токсичную форму − тиоцианаты, которые выводятся наружу через почки с мочой (Кнапик З. с соавт., 1981; Оксегендлер Г.И., 1989). Но существующие методы определения тиоцианатов в моче требуют усовершенствования, так как одни авторы предлагают большое разбавление пробы, что ведет к искажению результатов (Алексиев А.А., с соавт., 1986), другие − очень длительный по времени (3 часа) анализ (Geanjeloo A., 1980; Akira S., 1989).

Методы определения цианидов в смывах с кожных покровов и в моче, а также гигиенический норматив (ПДУ_зкп) могут применяться для санитарно − гигиенического контроля цианидов и в других отраслях народного хозяйства, где работники контактируют с цианистыми соединениями, например, в фармакологической промышленности, в сельском хозяйстве, при гальванических покрытиях (Швайкова М.Д., 1975; Лазарев Н.В., 1977).

Вышеизложенное обусловило актуальность проведения настоящего исследования.

Данная работа выполнялась по основному плану НИР АФ − НИИ МТ и ЭЧ ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН в рамках комплексной программы СО РАМН «Здоровье населения Сибири» (№ гос. рег. 0192001461). Кроме того, в диссертационной работе использованы материалы исследований, выполненных на хоздоговорных началах с ОАО «ИРГИредмет».

Цель исследования

Научное обоснование современных подходов к санитарно − химическому контролю цианистых соединений на золотоизвлекательных фабриках.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Изучить особенности формирования газовой фазы синильной кислоты в технологии извлечения металла на золотоизвлекательных фабриках в зависимости от ионного состава жидкой цианистой пульпы.

2. Разработать спектрофотометрический метод определения цианида калия в смывах с кожных покровов.

3. Усовершенствовать спектрофотометрический метод определения тиоцианатов в моче, как конечных метаболитов цианистых соединений.

4. Апробировать разработанные методы в токсикологических и в гигиенических исследованиях.

Научная новизна работы

Впервые установлена закономерность перехода цианида в воздух производственных помещений ЗИФ в зависимости от наличия в цианистой пульпе анионов хлора, сульфатов и тиоцианатов, приводящих к увеличению перехода цианида в воздух рабочей зоны. Присутствие в цианистой пульпе катионов цинка и меди в высоких концентрациях, наоборот, уменьшает выход цианида в воздух производственных помещений золотоизвлекательных фабрик (ЗИФ).

Научно обоснован спектрофотометрический метод селективного определения цианида калия в смывах с кожных покровов, основанный на реакции Кенига с применением дибарбитурата глутаконового альдегида, для которого установлен молярный коэффициент светопоглощения и сформулированы оптимальные условия проведения реакции: максимум светопоглощения λ_max = 586 нм, концентрация раствора барбитуровой кислоты 1%.

Впервые установлены токсикологические параметры при загрязнении кожных покровов цианидом калия, характеризующиеся LD, равному 34,6 мг/кг и ПДУ_зкп, равному 0,00006 мг/см² (по CN^-).

Практическая значимость работы

Разработанный спектрофотометрический метод определения цианида калия в смывах с кожных покровов и предельно допустимый уровень загрязнения кожных покровов (ПДУ_зкп) цианистыми соединениями утверждён в виде Методических указаний Главным государственным санитарным врачом РФ Г.Г. Онищенко 20.06.2000г (МУК 4.1.977 – 00).

Разработанный метод спектрофотометрического определения цианида калия в смывах с кожных покровов внедрён в санитарно − гигиенической лаборатории ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Иркутской области» и в цехе гидрометаллургии ЗИФ ОАО «Бурятзолото» (акты внедрения от 06.09.2007 и 14.03.2008 гг.).

Результаты исследований по влиянию состава цианистой пульпы на переход цианида в воздух производственных помещений были реализованы при разработке проектов золотодобывающих предприятий, применяющих цианирование (месторождение Светлинское, Ачинское и ряд других) (акт внедрения от 09.02.2007г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

− На формирование газовой фазы синильной кислоты в воздухе производственных помещений золотоизвлекательных фабрик влияет присутствие в цианистой пульпе высоких концентраций анионов хлора, сульфатов, тиоцианатов и катионов меди, цинка;

− Разработанные спектрофотометрические методы измерения массовых концентраций цианидов в смывах с кожных покровов и в моче, основанные на реакции Кенига, отвечают требованиям, предъявляемым нормативными документами к фотометрическому анализу, что делает возможным их использование в токсикологическом эксперименте и санитарно – гигиеническом контроле загрязнения кожных покровов работников цианистыми соединениями.

Апробация результатов исследований

Основные материалы диссертации представлены и обсуждены на региональной конференции «Проблемы медицинской экологии и здоровья человека в Сибири», г. Иркутск, 1996г.; конференции молодых учёных НИИ МТ и ЭЧ, г. Ангарск, 1997г.; научно – практической конференции «Проблемы и методические аспекты оценки и прогнозирования здоровья населения», г. Ангарск, 1997г.; научно – практической конференции «Региональные экологические проблемы и здоровье населения», г. Ангарск, 1999г.; Международном конгрессе молодых учёных «Науки о человеке», г. Томск, 2007г., материалы исследований докладывались и обсуждались на Ученых Советах НИИ МТ и ЭЧ, 2008г.

Публикации

По теме диссертационной работы опубликовано 11 статей, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК России и 1 сборник Методических указаний (МУК 4.1.977 − 00).

Личный вклад автора

Совместно с научным руководителем были определены цель и задачи, методология исследования. Самостоятельно разработаны методы, проведена апробация методов в токсикологических и натурных исследованиях.

Структура и объём диссертации

Диссертация состоит из введения, шести глав, выводов, списка использованной литературы, включающего 132 наименования (115 источников отечественных авторов и 17 зарубежных), приложений. Работа изложена на 131 странице машинописного текста, содержит 10 рисунков и 29 таблиц.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

При выполнении данной работы были использованы современные химико − аналитические, токсиколого − гигиенические и математико − статистические методы исследования.

В химико − аналитических исследованиях для изучения влияния некоторых ионов, присутствующих в жидкой цианистой пульпе, на переход синильной кислоты в воздух рабочей зоны, а также для разработки спектрофотометрических методов определения цианидов в смывах с кожных покров и в моче были использованы химические реактивы отечественного производства, которые соответствовали маркировке ЧДА и ХЧ.

В лабораторных условиях искусственно моделировали раствор цианплава (однокомпонентный раствор цианида натрия) и изучали влияние некоторых ионов на переход синильной кислоты в воздух производственных помещений. Всего было проанализировано 80 проб (работа выполнена при консультации к. т. н. Петрова В.Ф. зав. лаб. охраны окружающей среды ОАО «ИРГИредмет»).

Переход синильной кислоты в газовую фазу осуществляли методом барботирования пузырьков воздуха через слой раствора. Определение цианида осуществляли согласно Методическим указаниям по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (1986), по методике с использованием хлорамина и пиридин − барбитурового реактива (№ 3595 − 85).

Количественным критерием, характеризующим процесс фазового перехода синильной кислоты, являлся коэффициент распределения, рассчитанный по уравнению (1) (сборник методик по расчету выбросов в атмосферу загрязняющих веществ различными производствами, 1986):

(1), где

− коэффициент фазового распределения синильной кислоты;

− текущая концентрация синильной кислоты в газовой фазе, мг/дм³;

− исходная концентрация синильной кислоты в растворе, мг/дм³;

− текущая концентрация синильной кислоты в растворе, мг/ дм³;

− общий расход барботируемого воздуха на 1 дм³ раствора, дм³.

При добавлении в однокомпонентный раствор цианида натрия изучаемых ионов концентрацию синильной кислоты определяли в растворе расчетным путем с учетом константы ионизации синильной кислоты () (Лурье Ю.Ю., 1989) по уравнению (2) и констант устойчивости цианидных комплексов металлов () (Лурье Ю.Ю., 1989) по уравнению (3) (Инцеди Я., 1979):

(2), где

− исходная концентрация свободного цианида в растворе, мг/дм³;

− концентрация цианид − иона в растворе, мг/дм³.

(3), где

− общая концентрация цианида в растворе, мг/дм³;

− концентрация металла () в растворе, мг/дм³;

− константа устойчивости комплексов () металлов () в растворе;

− число групп лиганда металла.

При разработке методов количественного определения цианидов в смывах с кожных покровов и в моче готовили стандартные растворы из реактива цианида калия с содержанием основного вещества не менее 99% в пересчете на сухое вещество (ТУ 8465 − 79) и реактива калия роданистого (ГОСТ 4139 – 75).

Способ смыва цианида калия с кожных покровов выбирали согласно Методическим указаниям «Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснованию предельно допустимых уровней загрязнений кожи» (1980). Нами был выбран способ «обмыва», так как другие 4 способа смыва исследуемого вещества предполагают его большую потерю.

Метод спектрофотометрического определения цианида калия в смывах с кожных покровов разрабатывали согласно Методическим рекомендациям «Разработка методов определения вредных веществ на коже» (1985), которые требуют выполнения следующих условий:

• определяемый минимум (в мг/см²) вещества не должен превышать 0,5 − кратной величины предельно допустимого уровня (ПДУ) загрязнения кожных покровов;
  
• погрешность определения должна быть не более ± 25%;
  
• избирательность метода должна обеспечивать достоверное определение анализируемого вещества в присутствии сопутствующих примесей;
  
• в качестве смывающей жидкости должны быть использованы сравнительно безопасные для здоровья человека вещества, которые поглощают определяемое химическое вещество не менее 95%.
  

Измерение светопоглощения осуществляли на отечественном спектрофотометре СФ − 26.

В процессе разработки метода количественного определения цианидов в смывах с кожных покровов было выполнено 220 анализов, при определении цианидов в смывах с кожи белых крыс проанализировано 100 смывов, при определении содержания цианистых соединений в смывах с кожных покровов работников Нижне − Куранахской золотоизвлекательной фабрики было проанализировано 200 проб. В процессе отработки метода определения тиоцианатов в моче было выполнено 70 анализов, при определении тиоцианатов в моче белых крыс было проанализировано 120 проб.

Токсиколого − гигиенические исследования по оценке кожного действия цианида калия проводились на 6 кроликах породы «Шиншила», 22 морских свинках светлой масти массой 270 − 350г. и на 350 белых крысах обоего пола близких к линии «Вистор» с исходной массой 150г. Исследования выполнены сотрудниками лаборатории токсикологии НИИ МТ и ЭЧ с участием автора в соответствии с Методическими указаниями «Оценка воздействия вредных химических факторов на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнений кожи» (1980).

Для оценки состояния организма подопытных животных использовали следующие показатели:

− физиологические: масса тела и внешний вид животных. Реакцию со стороны глаз на внесение раствора цианида калия оценивали согласно Методическим указаниям за № 2196 − 80 (1980). Реакцию кожи на воздействие раствора цианида калия определяли визуально (покраснение) и измерением толщины кожной складки;

− биохимические: активность пероксидазы, содержание гемоглобина, количество эритроцитов, фагоцитарную активность лейкоцитов определяли в цельной крови. Гормоны щитовидной железы трийодтиронин (Т₃) и тироксин (Т₄) определяли радиоимунным методом в сыворотке крови;

− гистохимические: определение активности сукцинатдегидрогеназы, щелочной фосфотазы, содержание липидов и гликогена в клетках печени.

Сенсибилизирующее действие раствора цианида калия оценивали по результатам внутрикожного тестирования и реакциям in vitro: ППН − показатель повреждения нейтрофилов и РСАЛ − реакция специфической агломерации лейкоцитов.

Внутренние органы подвергали морфологическому исследованию с окраской гистологических препаратов гематоксилин − эозином.

Натурные исследования проведены на Нижне – Куранахской золотоизвлекательной фабрике АО “Алданзолото”, где используется ионообменная технология извлечения металла из руды.

Степень загрязнения кожных покровов определялась у рабочих трёх профессиональных групп, по роду своей деятельности контактирующих с цианистыми растворами пульпы. Данные исследования проводились по аналогии и в соответствии с Методическими рекомендациями “Гигиенический контроль за загрязнением кожных покровов работающих в контакте с фенолформальдегидными смолами” (1974). За “начало смены” взят промежуток в 1 – 2 часа после начала работы. Смывы с кожных покровов проводили у одних и тех же лиц в динамике смен и рабочей недели. Открытые участки кожи − это ладонная поверхность кисти руки и щека, где размер смываемого участка составлял 25 см². Закрытые участки – это кожа спины, размером 200 см² и кожа предплечья, размером 25 см².

Математико − статистическая обработка полученных результатов измерений в химических анализах проводилась с доверительной вероятностью 0,95 по общепринятым методикам (ГОСТ 12.1.016 − 79 «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ», ГОСТ Р ИСО 5735 − 2 − 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Части 1 − 6). Статистическая обработка данных выполнялась с помощью пакета прикладных программ Excel пакета Office 2003 (в ОС «Windows XP»).

Результаты экспериментальных исследований, полученные в токсикологическом эксперименте, были подвергнуты статистическому анализу с использованием метода Литчфилда и Уилкоксона, критерия (t) Стьюдента – Фишера.

Работа выполнена в соответствии с требованиями биомедицинской этики, утвержденными Хельсинской декларацией Всемирной медицинской ассоциации (2000).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При переработке золотосодержащих концентратов методами цианирования получаются сложные по составу пульпы, характеризующиеся повышенным содержанием солей (хлоридов, сульфатов, тиоцианатов), а также солей металлов, которые с цианистыми растворами образуют простые и комплексные цианиды. Присутствие этих веществ в пульпе может оказывать влияние на количественное образование синильной кислоты и переход её в газовую фазу, т. е. в воздух рабочей зоны и далее в атмосферный воздух.

Для определения влияния изучаемых ионов, входящих в состав цианистой пульпы на переход синильной кислоты в газовую фазу, искусственно моделировали различные режимы состояния технологических пульп с соблюдением условий, обеспечивающих изменение исследуемого параметра и постоянство остальных параметров. В расчётах использовали результаты трёх самостоятельных измерений, отличающихся по абсолютной величине не более чем на 5%.

За исходные показатели пульпы были приняты следующие значения:

− однокомпонентный раствор цианида натрия, с содержанием цианид − ионов 800 мг/дм³;

− показатель рН растворов при проведении эксперимента был равен 11,0 ± 0,05;

− температура раствора соответствовала 17,5⁰С ± 0,5⁰С.

Исследуемые изменяемые параметры − это соответствующие растворы солей натрия (роданистый, сернокислый и хлористый) с концентрацией анионов 100; 500; 1000; 2000 и 5000 мг/дм³ и растворы солей металлов − цинка, меди и железа, с концентрацией катионов 50; 100 и 500 мг/дм³, реально существующие в технологическом процессе.

Полученные расчётные данные коэффициента фазового распределения синильной кислоты в присутствии хлоридов, сульфатов и тиоцианатов свидетельствуют о том, что начиная с концентрации анионов 500 мг/дм³, коэффициент фазового распределения синильной кислоты начинает увеличиваться по сравнению с коэффициентом распределения однокомпонентного раствора цианида натрия, который равен 2,12 × 10^-4 (табл.1).

Самые высокие коэффициенты фазового распределения синильной кислоты наблюдаются при концентрации анионов в однокомпонентном растворе цианида натрия равной 5000 мг/дм³. Их действие подобно эффекту “высаливания”, свойственного поликомпонентным растворам (табл. 1).

Таблица 1

Влияние анионов хлора, сульфатов и тиоцианатов на переход синильной кислоты в воздух рабочей зоны

Концентрация анионов, мг/дм3	Изучаемые анионы
	SСN	SО	Сl
	Коэффициент фазового распределения синильной кислоты (К∙10-4), в присутствии изучаемых анионов
0	2,12	2,12	2,12
100	2,10	2,18	2,14
500	2,26	2,24	2,26
1000	2,31	2,29	2,34
2000	2,41	2,30	2.42
5000	2,47	2,54	2,38

При добавлении катионов меди и цинка в высоких концентрациях к однокомпонентному раствору цианида натрия наблюдалась тенденция к снижению степени перехода синильной кислоты в воздух производственных помещений. Катионы железа влияния на величину фазового распределения синильной кислоты практически не оказывали (табл. 2).

Таблица 2

Влияние катионов металлов на переход синильной кислоты в воздух рабочей зоны

Концентрация катионов металлов, мг/дм3	Изучаемые катионы
	Cu	Zn		Fe
	Коэффициент фазового распределения синильной кислоты (К*10-4) в присутствии катионов металлов
0	2,12		2,12		2,12
50	2,12		2,10		2,13
100	2,09		2,11		2,12
500	2,01		2,03		2,09

Для оценки соответствия требованиям к методикам измерения концентраций вредных веществ в смывах с кожных покровов нами были выбраны наиболее чувствительные и специфичные спектрофотометрические методы определения цианидов, основанные на реакции Кенига. При действии на пиридин хлористого циана пиридиновый цикл раскрывается с образованием глутаконового альдегида. В результате взаимодействия глутаконового альдегида с барбитуровой кислотой, вводимую в реакционную смесь, бразуется окрашенный дибарбитурат глутаконового альдегида (полиметиновый краситель):

Недостатком спектрофотометрических методов, основанных на реакции Кенига, является нестабильность окраски (Sarma А., 1985). Проанализировав общеизвестные методики определения цианида с применением хлорамина и пиридин − барбитурового реактива, мы пришли к выводу, что в основном исследователи используют 3% раствор барбитуровой кислоты (Алексиев А.А. с соавт., 1986; МУ, 1992; Eeden Peter C.H., 1985). Исследования, проведенные на устойчивость окраски полиметинового красителя во времени показали, что максимальное светопоглощение наблюдается через 5 минут после добавления в раствор пиридин − барбитурового реактива, окраска устойчива 40 минут (рис.1).



Рис. 1. Устойчивость окраски полиметинового красителя во времени с использованием в реакции 3% раствора барбитуровой кислоты (концентрация цианид − ионов в растворе 0,3 мкг/см³)

Руководствуясь исследованиями Sarma A. (1985) нами был испытан 1% раствор барбитуровой кислоты. Эксперименты показали, что наиболее оптимальным является использование 1% раствора барбитуровой кислоты. Окраска раствора достигает максимального значения через 10 минут после добавления пиридин – барбитурового реактива и устойчива в течение 2 − х часов (рис. 2).



Рис. 2. Устойчивость окраски полиметинового красителя во времени с использованием в реакции 1% раствора барбитуровой кислоты (концентрация цианид − ионов в растворе 0,3 мкг/см³)

На основании проведённых экспериментов нами предложен следующий состав пиридин – барбитурового реактива: 1г барбитуровой кислоты растворяют в колбе на 100 см³ в небольшом количестве дистиллированной воды. Добавляют 15,0 см³ свежеперегнанного пиридина, 3,0 см³ концентрированной соляной кислоты и доводят объём до метки дистиллированной водой. Реактив можно хранить в холодильнике в тёмной посуде в течение недели.

В соответствии с методическими рекомендациями «Разработка методов определения вредных веществ на коже» (1985) достоверные результаты получают при анализе дозированного количества вредных веществ, нанесенных на кожу испытуемых. В случае невозможности проведения указанного эксперимента, в качестве образцов можно применить изолированную кожу человека или свиную кожу.

Учитывая физико – химические свойства цианида калия и безопасность растворителя и также проведения эксперимента для здоровья человека, в качестве смывающей жидкости была выбрана дистиллированная вода, объем которой составил 10,0 см³. Смыв производят с поверхности изолированной свиной кожи через одну минуту после нанесения раствора цианида калия. Изолированную свиную кожу обрабатывают с помощью ватного тампона массой 0,3г. Смыв осуществляют трижды. Если смыв получается мутным, его фильтруют. Погрешность операции фильтрования пробы смыва составляет 2%.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость светопоглощения от массы цианида калия, устанавливают по 5-ти сериям растворов для градуировки. Каждая серия состоит из 6-ти растворов. Растворы готовят в пробирках в соответствии с таблицей 3.

Таблица 3

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении цианида калия в смывах с кожных покровов

№ раствора для градуировки	Стандартный раствор с содержанием цианид − ионов 1,0 мкг/см3, см3	Дистиллированная вода, см3	Содержание цианид − иона, мкг
1	0,0	3,0	0,0
2	0,1	2,9	0,1
3	0,2	2,8	0,2
4	0,4	2,6	0,4
5	0,8	2,2	0,8
6	1,0	2,0	1,0

На анализ берут 3,0 см³ смывной жидкости, добавляют 0,2 см³ 1% раствора хлорамина и 1,0 см³ пиридин – барбитурового реактива. Через 10 минут светопоглощение растворов замеряют на СФ – 26 в кюветах 1,0 см при длине волны 586 нм относительно холостой пробы (раствор для градуировки № 1). Содержание цианида калия в смывах определяют по градуировочному графику (рис. 3).



Рис. 3. Зависимость светопоглощения от содержания цианид − иона в

анализируемом объеме пробы

В заданном диапазоне концентраций от 0,1 до 1,0 мкг установлена линейная зависимость, что свидетельствует о соблюдении закона Ламберта – Бугера – Бера (Алексеевский В.Б. с соавт., 1988). Нами было установлено, что максимальная величина молярного коэффициента светопоглощения () дибарбитурата глутаконового альдегида приходится на длину волны 586 нм и равна 0,2 × 10⁵ (рис.4).



Рис.4. Спектральная характеристика окрашенного раствора цианида калия

Метрологические характеристики в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе приведены в таблице 4.


Таблица 4

Значения оперативного контроля измерения концентраций цианида калия в смывах с кожных покровов

Диапазон определяемых концентраций цианида калия при смыве с площади 25 см2 (по CN-), мг/см2	Наименование метрологической характеристики
	Характеристика погрешности, мг/см2, (P = 0,95)	Норматив оперативного контроля погрешности, = K, мг/см2, (m = 3, P = 0,90)	Норматив оперативного контроля воспроизводимости, R = D, мг/см2
От 0,000013 до 0,00018	0,003 + 0,01С	0,002 + 0,012C	0,006 + 0,039С