Сергиев Владимир Петрович Член-корреспондент рамн, доктор медицинских наук, профессор Кутырев Владимир Викторович Ведущая организация: гоу апо российская медицинская академия постдиплом

Вид материала

Подобный материал:

1 2 3 4 5 6

Таблица 9 .

Результаты обследования больных хронической формой бруцеллеза с различной давностью заболевания

Давность заболевания (месяцы	Серологические методы								Бактериологи ческий	ПЦР
	РА		РК		РПГА		ИФА		Бактериологи ческий	ПЦР
	% пол.	титр*	% пол.	титр*	% пол.	титр*	% пол.	титр*	% пол.	% пол.
6-12 (n=25)	96,0±4,0±	1:256	96,0±4,0	1:640	88,0±6,6	1:200	100	1:6400	24±	92,0±5,5
12-24 (n=18)	94,4±5,6	1:200	100	1:320	77,8±10,1	1:200	100	1:4000	16,7±	100
24-36 (n=6)	100	1:80	100	1:160	33,3±21,0	1:100	83,3±16,7	1:2000	-	100
36-60 (n=5)	100	1:64	100	1:256	20,0±20,0	1:100	100	1:500	-	100
Более 60 (n=7)	42,9±20,2	1:50	71,4±18,4	1:128	14,3±14,3	1:200	100	1:1000	-	85,7±14,3

*- средняя величина геометрического титра

Выводы

1.Впервые проведен анализ эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по бруцеллезу в РФ за период 1997-2006 годы, который позволил выявить и научно обосновать влияние социально-экономических факторов на эпидемические проявления бруцеллеза на конкретных территориях.

2.Установлен рост числа территорий субъектов РФ с регистрацией бруцеллеза животных и людей с 39(43,8%) в 1991-1996 гг. до 58(65,9%) в анализируемый период. Основное эпизоотолого-эпидемиологическое неблагополучие по бруцеллезу за период 1997-2006 гг. определяли Южный (Республики Дагестан, Калмыкия, Северная Осетия, Карачаево-Черкесская, Кабардино-Балкарская и Ставропольский край) и Сибирский (Р.Тыва) Федеральные Округа, на которые приходится 72,7±0,7% больных людей бруцеллезом (впервые установленным), и большая часть пунктов, неблагополучных по бруцеллезу животных: 96,7±0,9% по бруцеллезу крупного и 98,4±1,6% мелкого рогатого скота.

3.Показано, что причинами непрогнозируемого осложнения эпидемиологической обстановки по бруцеллезу на благополучных территориях в современный период могут быть трансграничные перемещения животных при отсутствии надлежащего ветеринарного и таможенного контроля.

4.Выявлено расширение спектра эпидемически значимых резервуаров и источников бруцеллезной инфекции, вызываемой B.melitensis (козье-овечий тип), за счет интенсификации миграции возбудителя на неспецифических хозяев (крупный рогатый скот).

5. Впервые на территории РФ выявлена циркуляция бруцелл вида canis (два биовара) среди собак. Получены данные, позволяющие предположить о завозе B.canis из-за рубежа с собаками-компаньонами.

6. Современные особенности эпидемического проявления бруцеллезной инфекции состоят в:

- преобладании острых клинических форм бруцеллеза у людей, в том числе детей до 14 лет с выделением гемокультур B.melitensis на территориях Южного и Сибирского ФО, неблагополучных по бруцеллезу КРС и МРС, и первично-хронических форм – на территориях Сибирского, Уральского, Приволжского, Дальневосточного ФО, неблагополучных или условно «благополучных» по бруцеллезу КРС;

- частой регистрации больных с неустановленным источником инфекции - 25 территорий (28,4±0,9%) субъектов РФ. Последнее указывает на то, что больной бруцеллезом человек, по-прежнему, является «индикатором» эпизоотического неблагополучия территории;

- изменении профессиональной структуры заболеваемости в сторону значительного увеличения доли больных, не связанных с общественным животноводством -70,7±0,7% (50,8±1,6% - владельцы животных индивидуального сектора, 19,9±1,2% - не работающие лица, пенсионеры, домохозяйки и др.);

- значительной доле алиментарного пути заражения инфекцией (23,9±1,1%);

- удлинении сроков сезонности заболеваемости до 7-8 мес. в очагах смешанного типа;

- сохранении высокого уровня заболеваемости городских жителей (до 24,9±0,6%), в том числе детей до 14 лет (до 27,1±1,3%);

- росте числа больных с неблагоприятным трудовым прогнозом с 2003 по 2006гг в 1,5 раза, что составило 25,9±0,5% от общего числа больных хроническим бруцеллезом

7. Сравнительный анализ разработанных иммунологических тестов для обнаружения бруцелл и их растворимых антигенов (РИФ, ФИАВР, РПГА, РНАт, РАГА, РК, ИРМА), а также ПЦР выявил различные диагностические возможности их использования в эпидемиологической и клинической практике. Показано, что методом выбора для выявления бруцелл и их растворимых антигенов в объектах внешней среды и биологическом материале являются РИФ, ИФА и ПЦР.

8.Обоснована универсальность использования ИФА для лабораторной диагностики бруцеллеза в эпидемиологической и клинической практике, позволяющего выявлять бруцеллезный антиген и специфические антитела разных классов иммуноглобулинов. Определение уровня специфических IgG,A,M позволяет судить об активности инфекционного процесса, вероятности повторного заражения, характере местных воспалительных изменений со стороны костно-суставной системы, что, в конечном итоге, способствует улучшению диагностики и качества лечения.

9.Установлена высокая диагностическая эффективность ПЦР при бруцеллезной инфекции:

- высокая чувствительность и специфичность ПЦР обеспечивала возможность верификации диагноза на всем протяжении инфекционного процесса (в острой, подострой и хронической стадиях болезни) и выявления активности инфекционного процесса у больных хроническим бруцеллезом при больших сроках давности (до 60 мес и более);

- использование ПЦР в эпидемиологической практике позволило устанавливать инфицирование людей в различных очагах инфекции гораздо чаще, чем традиционные методы серологической диагностики. При этом положительный результат в ПЦР имеет практическое значение только при наличии клинических признаков болезни из-за возможности определения ДНК бруцелл у лиц, имеющих контакт с живыми вакцинными штаммами, которые выделяются привитыми животными во внешнюю среду. Последнее необходимо учитывать при интерпретации положительных результатов данной реакции;

- применение ПЦР для регистрации ДНК бруцелл во внешней среде, искусственно контаминированной возбудителями бруцеллеза (B.abortus 99 и B.suis 1330), показало высокую чувствительность теста даже при минимальном содержании микробных клеток (10 - 10²), что указывает на перспективность использования этого теста в целях контроля пищевых продуктов.

10.Подтверждена длительная персистенция возбудителя бруцеллеза в макроорганизме с помощью современных методов детекции специфических антигенов и антител в эксперименте и клинике. Установлено, что в так называемую «стерильную» фазу инфекционного процесса, когда возбудитель бруцеллеза уже не выделяется (12 мес. от начала заражения вирулентной культурой бруцелл), наступает пик циркуляции специфического антигена и антител продолжительностью до 23 мес. (срок наблюдения), тестируемый ИФА. Специфический антиген и ДНК бруцелл выявлялись также в течение длительного срока (более 5 лет) заболевания у людей.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

Желудков М.М., Павлова И.П., Шаханина К.Л., и др. Определение специфических антител иммуноферментным методом при бруцеллезе у людей./ В.сб. Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций. Иркутск.-1984.- ч.2.- С.102-103.
Чернышева М.И.,Желудков М.М., Перекопский И.С. Сравнительная оценка метов определения IgG антител при бруцеллезе у людей.// ЖМЭИ. -1986.- №2.- С.114-116.
Чернышева М.И., Желудков М.М., Перекопский И.С. Определение специфических гемолизинов у больных бруцеллезом в непрямой реакции гемолиза. // ЖМЭИ.- 1986.-№4.- С.75-78.
Желудков М.М., Павлова И.П. Умнова Н.С.Эффективность иммуноферментного анализа при диагностики бруцеллеза у людей. /В сб.Актуальные вопросы иммунодиагностики особо опасных инфекций. Тез.докл., всесоюз.н.-практ. конф. Ставрополь.- 1986.-Ч. I.- С. 96-98.
Желудков М.М.,Павлова И.П., Умнова Н.С., Перекопский И.С.Иммуноферментный метод в диагностике бруцеллеза у людей.// ЖМЭИ.- 1986.- №8.- С.59-63.
Умнова Н.С., Желудков М.М., Павлова И.П., Шаханина К.Л.Выявление антигенов возбудителя бруцеллеза иммуноферментным методом. // ЖМЭИ.- 1986, №9., С.103-107.
Желудков М.М., Чернышева М.И. Использование дитиотреитола для выявления специфических IgG антител при бруцеллезе.// Лаб. дело.- 1987.- № 11.- С.870-871.
Губина Е.А., Желудков М.М.,Дъяков С.И., Лебедева И.К. Иммунофлуоресцентный экспресс метод определения антибиотикочувствительности бруцелл.// Антибиотики.- 1989.-Т.XXXXIY.- №2.- С.109-112.
Zheludkov M.M., Pavlova I.P. Immunoenzymatic assey in diagnosis of Brucellosis. /Zoonoses Congress with Innternational Paticipation Brno,Czechoslovakia.-1988.-8.-11B.-P.11.
Токарева Л.Е. Горелов В.Н.,Желудков М.М. Подбор тестов для выявления клонированных в клетках E.coli антигенов B.abortus 99./ В сб. Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным. Тезисы докл.Всесоюз. конференция.- Москва.- 1989.-С.82-84.
Чернышева М.И., Желудков М.М.,Власова И.В.Лабораторная диагностика бруцеллеза (Учебное пособие). Москва.-1988.-С.42.
Желудков М.М. Перспективы совершенствования лабораторной диагностики бруцеллеза./ В сб. Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным. Тезисы докл. Всесоюз. конференция. Москва.- 1989.- С.91-92.
Желудков М.М., Павлова И.П., Умнова Н.С., и др. Использование иммуноферментного анализа для выявления бруцеллезных антител разных классов./ В сб. Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным. Тезисы докл. Всесоюз. конференция. Москва.- 1989.- С.107-108.
Пономарева И.В., Шаханина К.Л., Желудков М.М. Использование лантанидного флуоресцентного иммуноанализа для выяления специфических антител при бруцеллезе у людей. / В сб. Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным. Тезисы докл. Всесоюз. конференция. Москва.- 1989.- С.111-112.
Желудков М.М., Павлова И.П. Иммуноферментный метод – универсальный метод диагностики бруцеллеза./ В сб.Применение иммуноферментного анализа в медицине (тезисы докл.).-Харьков.-1989.- С.87-88.
Польщикова Н.Н., Желудков М.М., Никифоров В.Н., и др. Трудности оценки активности хронического бруцеллеза и выборов методов терапии. // Сов.медицина.- 1989.- №11.- С 109-110.
Пономарева И.В. Шаханина К.Л. Желудков М.М. Использование флуоресцентного иммуноанализа с временным разрешением для диагностки бактериальных и вирусных инфекций./ В сб.Новые методы диагностики СПИД, других вирусных и бактериальных инфекций в практике инфекционной и противоэпидемической службы.Тезисы докл.- Алушта.-1990.- С.98-99.
Zheludkov M.M. ELISA – a universal method for Brucellosis diagnosis. /In Advances in Brucellosis research Texas A and V Univ., Press Colostation Egit by L.C.Adams.- 1990.- P.494-495.
Желудков М.М.,Чернышева М.И.,Павлова И.П., и др. Специфические иммуноглобулины разных классов при бруцеллезе у людей.// Тер.архив.- 1990.-№11.- С.42-46.
Желудков М.М., Бартова Л.М., Сулейманов А.К., Магамедова Д.А. Определение уровня Р-белков в сыворотке крови при бруцеллезной инфекции. // В сб.Новые методы прогноза патологического процесса. Под ред. Кульберга А.Я. -М.-1991.- С.11-12.
Опалейчук И.С., Желудков М. М., Умнова Н.С., Павлова И.П. Использование реакции агглютинации латекса для диагностики бруцеллезной инфекции. //ЖМЭИ.-1991.-.№7.- С.61-63.
Желудков М.М., Сулейманов А.К., Магамедова Д.А.Актуальные вопросы лабораторной диагностики бруцеллеза. / В сб.Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций. Тезиса докл. науч.конфер.-991В сб. Актуальные проблемы химиотерапии бактериальных инфекций. Тезисы докл.Всес. конф.- 1991.- С.29-30.
Желудков М.М., Губина Е.А., Лебедева И.К., Дъяков С.И. Разработка экспрессного метода антибиотикочувствительности бруцелл. //Антибиотики и химиотерапия.-1992.-Т.37.- №5.- С.12-14.
Желудков М.М.,Чернышева М.И., Павлова И.П. и др. Антигенемия в динамике инфекционного и вакцинного процессов при бруцеллезе. //ЖМЭИ.-1992.- № 7-8.- С.71-75.
Сулейманов А.К., Желудков М.М. Сравнительная клинико-иммунологическая характеристика бруцеллеза у людей, проживающих в эндемичных очагах. /В сб. Съезд врачей инфекционостов в г.Суздале (сентябрь 1992 г.). Москва-Киров.-1992.- Т.II.- С.222-223.
Желудков М.М., Павлова И.П., Сулейманов А.К., и др. Специфические иммуноглобулины G, A, M, E при бруцеллезе у людей. /В сб. Съезд врачей инфекционостов в г. Суздале (сентябрь 1992 г.). Москва-Киров.-1992.- Т.II.- С.224-226.
Желудков М. М., Чернышева М.И., Павлова И.П., и.др. Специфические IgE антитела при бруцеллезе.// Рос. мед. журнал.- 1992.-№ 5-12.- С.17-19.
Покровский В.И., Сулейманов А.К.,Лебедев В.В., Желудков М.М., и др. Иммунореабилитирующее действие тимогексина при лечении больных хроническим бруцеллезом.// Тер. архив.- 1992.-№ 11.- С.22-26.
Сулейманов А.К., Желудков М.М., Чернышева М.И., и др. Динамика уровней специфических иммуноглобулинов классов G,A,M и Е в процессе лечения больных хроническим бруцеллезом.// Тер. архив.- 1992.-№ 11.- С. 26-28.
Suleimanov A.K., Zheludkov M.M., Chernisheva M.I., et al. Changes in levels of specific IgG, IgA, IgM and IgE during treatment of patients with chronic Brucellosis.// Sov. Arch. Internal Med.-1992.-V.64.- N 6.- P.644-646.
Pocrovskii V.I., Suleimanov A..K., Lebedev V.V., Zheludkov M.M. et al. Immunorehabilitative effect of Thymohexin in treatment of chronic Bructllosis patients.// Sov. Arch. Internal Med.-1992.-V.64.- N 6.-P. 647-651.
Сулейманов А.К., Ющук Н.Д., Никулин В.Н., Кузнецов В.Ф., Желудков М.М. Функциональная активность нейтрофилов периферической крови у больных хроническим бруцеллезом. // ЖМЭИ.-1993.-№4.- С.99-103.
Желудков М.М., Маликов В.Е., Таран И.Ф.Бруцеллез. //Информационный бюллетень об инфекционных и паразитарных заболеваниях Российской Федерации. -Москва.- 1993.-С.145-151.
Гандара Б., Желудков М.М., Чернышева М.И. Оценка эффективности методов лабораторной диагностики бруцеллеза.// ЖМЭИ.- 1994.- №4.- С.55-58.
Желудков М.М., Магамедова Д.М., Кулагина Н.Н., Кульберг А.Я.Изучение уровня Р-белков в динамике инфекционного процесса при экспериментальном бруцеллезе.// Иммунология.- 1994.- №1.- С.55-58.
Драновская Е.А., Желудков М.М., Толмачева Т.А., и др. Иммунобиологическая активность и физико-химические свойства компонентов клеточной стенки бруцелл и Y.enterocolitica 0:9.// Ветеринария.-1995.- №11.- С.34-37.
Шумилов К.В., Калмыков В.В., Михайлов Н.А., Желудков М.М. и др. Свойства штамма бруцелл, выделенного из абортированного плода собаки. // В сб.научных трудов ВГНКИ. – 1995.- Т. 57.- С.179-187.
Шумилов К.В., Калмыков В.В., Михайлова Ю.П., Желудков М.М. Случай выявления бруцеллеза собак в России. //Ветеринария.-1996.- №5.- С.55-59.
Драновская Е.А., Желудков М.М., Толмачева Т.А. и др. К вопросу о внутриклеточном паразитизме и персистенции бруцелл. / В.сб. Актуальные вопросы профилактики особо опасных и других инфекционных заболеваний. Мат.науч.-практи. Конф. “60 лет противочумной службы Кавказа”. Ставрополь.- 1995.-С.269-271.
Желудков М.М., Маликов В.Е., Драновская Е.А.Совершенствование иммуноферментного анализа для диагностики бруцеллеза. / В.сб. Актуальные вопросы профилактики особо опасных и других инфекционных заболеваний. Мат.науч.-практи. Конф. “60 лет противочумной службы Кавказа”. Ставрополь.- 1995.- С.149-151.
Желудков М.М. Бруцеллез. Анализ деятельности центров госсанэпиднадзора по лпбораторной диагностике особо-опасных и природно-очаговых инфекций по итогам 1994 года.// Информационный сборник статистических и аналитических материалов.- М.- 1995.- Вып.18.- Раз. 12.- С.11-12.
Malikov V.E., Zheludkov M.M., Dranovskaya E.A. Appliance of Poly-B antigen in laboratory diagnostic of Brucellosis. / Suppl. biochimica clinical.- 1995.- V.19.- N.10.- P.25.
Zheludkov M.M., Dranovskaya E.A., Magomedova D.A. Specific ELISA for detection of human antibody to Brucella./ XY International Symposium W.A.V.M.I. Salmonellosis – Brucellosis.-Cyprus.-1997.- P.58.
Dranovskaya E.A. Zheludkov M.M. Toxonomy and molecular biology of Brucellae. / XY International Symposium W.A.V.M.I. Salmonellosis – Brucellosis.- Cyprus.- 1997.- P.64.
Kulakov Y.K., Zheludkov M.M., Dranovskaya E.A. et al. Comparative characteristics of molecular-biological and immunochemical properties of B.canis strains. / XY International Symposium W.A.V.M.I. Salmonellosis – Brucellosis.- Cyprus.- 1997.- P.65.
Кулаков Ю.В., Желудков М.М., Селютина Д.Ф., и др. Разработка современных средств диагностики и профилактики бруцеллеза с использованием методов генной инженерии. Мол. генетика, микробиол. и вирусол.-1994.-№5.- С.32-34
Желудков М.М.,Яшина Н.В., ,Прокопов Н.И., Ишков А.И. .Применение объемной реакции агглютинации латекса в диагностике бруцеллеза.// Биомедицинские технологии.- 1996.- Вып.3.- С.63-67.
Кулаков Ю.К., Желудков М.М., Драновская Е.А., Сковронская А.Г Сравнительное изучение антигенного состава штаммов Brucella canis методом иммуноблотинга.// Мол.генетика, микробиол. вирусол.-1997.-№3.- С.15-17.
Магомедова Д.А.,Сулейманов А.К, Желудков М.М. Лабораторные показатели в динамике иммунотерапии больных хроническим бруцеллезом. / Int.J. on Immunorehabilitation. -1997.- N 4.-P.49.
Желудков М.М.Шумилов К.В., Толмачева Т.А., и др. Первое выделение B.canis на территории Российской Федерации. / В сб.Мат. YII съезда Всеросийского общества эпидем.,микробиол. и паразитол. М.-1997.-Т. I.- С.72-73.
Желудков М.М., Маликов В.Е., Таран Ю.Ф. Бруцеллез в Российской Федерации. / В сб.Мат. YII съезда Всеросийского общества эпидем.,микробиол. и паразитол. М.-1997.-Т. I.- С.73-74.
Кулаков Ю.К., Желудков М.М., Лаврова В.А., и др. Сравнительный анализ антигенов различных видов Brucella методом иммуноблота с антисыворотками иммунизированных кроликов.// Мол.генетика, микробиол. вирусол.- 1998.- №2.- С.7-13.
Желудков М.М., Кулаков Ю.К.Использование в иммуноферментном анализе белковых антигенов бруцелл, синтезированных в клетках Escherichia Coli. //ЖМЭИ.- 1998.- №5.- С.74-77.
Кулаков Ю.К. Желудков М.М.,Селютина Д.Ф.,Скавронская А.Г.Чувствительность и адаптация различных видов бруцелл к кислотному шоку.// Мол.генетика, микробиол. и вирусол.- 1999.- №3.- С.8-12.
Кулаков Ю.К., Желудков М.М.,Селютина Д.Ф.,Скавронская А.Г.Повышенная продукция белкового антигена Brucella melitensis в клетках Eshericchia coli.//Мол.генетика, микробиол. и вирусол.- 1999.- №4.- С.15-19.
Smits H.L., Basahi M.A., DiazR. ……. Zheludkov M.M. et al. Development and evaluation of a rapid Dipstic Assay for serodiagnosis of acute human Brucellosis. // J.Clin. Microbiol.-1999.-V.37.- N3.- P.4179-4182.
Кулаков Ю.К., Желудков М.М., Т.А. Толмачева и др. Использование молекулярно-биологических методов идентификации бруцелл в сравнительном анализе штаммов, выделенных от больных собак. // Мол. генетика, микробиол. и вирусол.- 2000.- № 4.- С.7-12.

Blog

Таблица 9 .

Результаты обследования больных хронической формой бруцеллеза с различной давностью заболевания