Авторефераты по всем тема?/b> >>
Авторефераты по биологии
На правах рукописи
Сиротина Светлана Сергеевн?/
АНАЛИЗ РОЛИ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ВАРИАНТО?ИНТЕРЛЕЙКИНО??ФОРМИРОВАНИИ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТ??ХРОНИЧЕСКОМУ ЛИМФОЛЕЙКОЗУ
03.02.07 ?генетика
АВТОРЕФЕРА?
диссертаци?на соискани?ученой степен?
кандидат?биологически?наук
Белгород ?2012
Работа выполнен??nbsp; Федерально?государственно?nbsp; автономном образовательно?учреждении высшег?nbsp; профессиональног?образования "Белгородский государственны?национальный исследовательски?университе? Минобрнаук?РФ
Научны?руководитель: Чурносов Михаил Иванович
доктор медицински?наук, профессо?/p>
Официальны?оппонент?
Батлуцкая Ирин?Витальевна
доктор биологически?наук, доцент, ФГАО?nbsp; ВП?nbsp; "Белгородский государственны?национальный исследовательски?университе? Минобрнаук?РФ, заведующ? кафедрой биотехнологи??микробиологи?/p>
Жукова Ольг?Владимировна
доктор биологически?наук, профессо? ФГБУ?Институ?обще?генетики им. Вавилова Российской академии наук? заведующ? лабораторией генетики человека
Ведущая организация: Государственно?бюджетно?образовательно?учреждение высшег?профессиональног?образования Российски?национальный исследовательски?медицински?университе?имен?? ? Пирогова?Минздравсоцразвития РФ
Защита диссертаци?состоится л___?___________ 2012 года ?л____?часо?на заседани?nbsp; совета по защите диссертаци?на соискани?ученой степен?кандидат?наук, на соискани?ученой степен?доктор?наук ?212.015.13 пр?ФГАО?nbsp; ВП?"Белгородский государственны?национальный исследовательски?университе? по адресу: 308015, ? Белгород, ул. Победы, 85.
?диссертацией можн?ознакомить? ?Научно?библиотеке ФГАО?nbsp; ВП?"Белгородский государственны?национальный исследовательски?университе?
Авторефера?разослан л________________2012 ?
Ученый секретар?совета по защите
диссертаци?на соискани?ученой
степен?кандидат?наук, на соискани?/p>
ученой степен?доктор?наук ?212.015.13
доктор биологически?наук ?? Кочкаров
ОБЩА?ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Проблема лейкозов являет? одно?из важных ?современно?медицине. ?мире наблюдается непрерывны?рост заболеваемости лейкозам?[Hamblin T.J. et ?., 2002; Никити????др., 2010]. Пр?этом одно?из наиболее распространенных форм лейкоз?являет? хронически?лимфолейко?(ХЛ?. Хронически?лимфолейко??опухолевое заболевани?лимфатическо?ткан? ?основе развит? которого лежи?моноклонов? пролиферац? патологических лимфоидных элементо?[Морозова ?? ?др., 2002, Воробьев ?? ?др., 2003, Никити??? ?др., 2003]. Ежегодная заболеваемость ХЛ?состав?ет 2,5-3 на 100 ты? населения, ?для ли?старше 60 ле??до 10 на 100 ты??населения [Kini A. et al., 2000; Морозова ?? ?др., 2002, Воробьев ?? ?др., 2003, Quiney C. et al., 2007]. Течени?хронического лимфолейкоза характеризуется развитие?различны?осложнений: инфекционных (?85% пациенто?, цитопенических ?анем? (15?0%) ?тромбоцитопения (5?5%), снижающи?продолжительност?жизн?больны?[Дорони??? ?др., 2003; Алексеев??? ?др., 2008; Damle RN., et al., 2010].
Изучение факторов, опреде?ющих формирование хронического лимфолейкоза, продолжает оставать? ?центре вниман? отечественны??зарубежных ученых [Caporaso N., et al., 2004; Eichhorst B. et al., 2008 Bianchi S. et al., 2010; Lee B.N. et al., 2011; Войцеховский ??, 2007; Бидерман ??, 2008; Данилова ?? ?др., 2009]. Ка?свидетельствую?результаты ?да исследований [Hjalmar V., 2002; Stevenson F.K., Caligaris-Cappio F., 2004; Клинко??? ?др., 2004; Гр??? ?др., 2008;], значимую роль ?развитии ХЛ?играют генетические фактор? Сред?гено?кандидатов, регулирующих, преимущественн? процессы неспецифическо?защиты организм? гемопоэз? апоптоза, ?опухолевой прогрессии, важное значение для хронического лимфолейкоза имею?гены интерлейкино?[Nckel H., 2004; Tomic J. et al., 2006; Dhner H. et al., 2011; Антонеев??? ?др., 2007]. Интерлейкины ?полипотентны?вещества белковой природ? обладающие множественными биологическими эффектам?[Ко?кина ??, 2004]. Яв?ясь начальны?звеном активаци?иммунног?ответа, он?опреде?ют эффективност??ти?иммунног?реагирован?, принимаю?непосредственное участи??регу?ци?апоптотических ?аутоиммунных процессо?[Ana M. Peiro, 2008, Кетлинский ??, 2008].
Клиник?генетические работы, посвящённые молеку?рн?генетическим аспектам хронического лимфолейкоза ?России немногочислены ?затрагиваю?преимущественн?nbsp; гены факторов некроз?опухолей ?детоксикации [Клинко??? ?др., 2004; Бакиро???, ?др., 2005;2010; Гр??? ?др., 2008; Овсе???? ?др., 2010, Тикунова ??, 2011]. Комплексны?nbsp; исследован? роли полиморфны?генетических маркеров интерлейкино??отношени?хронического лимфолейкоза ?наше?стране до си?по?не проведен? Эт?диктуе?необходимост?выполнен? наст?щего исследован?.
Работа выполнен??рамках федерально?целево?программ?Научные ?научно-педагогические кадр?инновационно?России?на 2009-2013 годы (госконтрак??14-740-11-0627)
Цель исследован?:
Изучит?генетические полиморфизмы интерлейкино??оценит?их патогенетическую значимость для хронического лимфолейкоза.
Задачи исследован?:
1. Изучит?ассоциации генетических варианто?интерлейкино?(VNTR IL-1Ra, -889C/T IL-1? -511C/T IL-1B, -590C/T IL-4, -703C/T IL-5, -174 G/C IL-6, -251??IL-8, T113M IL-9, -592C/A IL-10) ?формирование?хронического лимфолейкоза.
2. Рассмотрет?вкла?сочетани?гено?интерлейкино??генетическую предрасположенност??хроническому лимфолейкозу.
3. Провести анализ ассоциаций полиморфизмо?гено?интерлейкино??качественным?патогенетическ?значимым?фенотипами ХЛ?
4. Определить связи гено?кандидатов ?клиник?лабораторным?показате?ми больны?ХЛ?
5. Выявить вл?ни?генетических полиморфизмо?на общу?выживаемость больны?хронически?лимфолейкозо?
Научная новизн?
Впервы?установлен?важное патогенетическое значение генетических полиморфизмо?интерлейкино?(-511C/T IL-1B, -889C/T IL-1, -590C/T IL-4, -703C/T IL-5, -174G/C IL-6, -251??IL-8, T113M IL-9, -592C/A IL-10, VNTR IL-1Ra) пр?хроническо?лимфолейкозе сред?населения Центрального Чернозем? РФ.
Выявлен?ассоциации полиморфны?генетических маркеров ?формирование?хронического лимфолейкоза. Показа?вкла?сочетани?гено?интерлейкино??генетическую предрасположенност??хроническому лимфолейкозу. Установлен?связи генетических варианто?интерлейкино??патогенетическ?значимым?качественным??количественным?признаками хронического лимфолейкоза. Выявлен?генетические фактор? снижающи?общу?выживаемость больны?ХЛ?
Научно-практическое значение.
Результаты работы внося?вкла??расшифровк?генетических механизмов предрасположенност??хроническому лимфолейкозу, формирование представлени??молеку?рн?генетических основа?заболевания. Генотипировани?больны?ХЛ?по гена?интерлейкино?позволит формироват?группы риск??желого течения болезн? ?цель?боле?эффективно?реализации сред?этих пациенто?комплекс?лечебн?профилактических меропр?ти? направленных на предотвращение неблагоприятног?исхода ХЛ? Результаты исследован? используют? ?учебно?процессе пр?преподавании медицинско?генетики ?ФГАО?ВП?Белгородски?государственны?национальный исследовательски?университет.
Положения, выносимы?на защиту:
1. Генетические варианты интерлейкино??их сочетания опреде?ют предрасположенност??хроническому лимфолейкозу.
2. Полиморфизмы гено?интерлейкино?пр?вляют плейотропное действие пр?формировании ХЛ?.
3. Гены-кандидат?ассоциирован??патогенетическ?значимым?качественным??количественным?признаками ХЛ?
4. Факторам? снижающими общу?выживаемость больны?хронически?лимфолейкозо? являют? -590?IL-4, -174G IL-6 ?наличи?цитопенических осложнений ?течени?заболевания.
Апробация работы. Основные результаты диссертаци?доложены ?обсужден?на: X Международно?конгресс?Здоровь??образовани??XXI веке?Инновационные технологии ?биологии ?медицине?(Москва, 2009), Межрегионально?научно-практической конференци?Актуальны?вопрос?диагностик??лечения заболевани?внутренних органов (Белгород, 2009), IX Всероссийско?университетско?научно-практической конференци?молоды?учёных по медицине (Тула, 2010), Международно?научно-практической конференци?Актуальны?вопрос?полиморбидно?патологи??клиник?внутренних болезней?(Белгород, 2010), IV Международно?научно?конференци?молоды?ученых-медико?(Курс? 2010), V Международно?(XIV Всероссийско? Пироговско?научно?медицинско?конференци?(Москва, 2010), третье?международно?научно-практической конференци?Геронтологические чтен? ?2010?(Белгород, 2010), VI Съезде Российског?общества медицински?генетико?(Ростов-на-Дону, 2010), VI Международно?Пироговско?научно?медицинско?конференци?(Москва, 2011), II Всероссийско?научно-практической конференци??международны?участием Медик?биологически?аспект?мультифакториально?патологии (Курс? 2011), VII Международно?Пироговско?научно?медицинско?конференци?(Москва, 2012), ?то?международно?научно-практической конференци?Геронтологические чтен? ?2012?(Белгород, 2012).
ичный вкла?автора. Авторо?личн?определены цель ?задачи исследован?, разработан?методические подход?для их решения. Авто?личн?выполнил молеку?рн?генетическое исследование, провел обработк? анализ ?обобщени?полученных результато? подготовил основные публикации по выполненно?работе, написа??оформи?рукопись.
Публикации. По материалам диссертаци?опубликовано 13 печатных рабо? ?то?числ?5 ?журналах из списка ВА?
Структур??объе?диссертаци?/. Диссертация состои?из следующи?разделов: введение, обзо?литературы, описание использованных материалов ?методо? результаты ?их обсуждение, ?такж?выводы ?список литературы. Материал?диссертаци?изложены на 155 страница?машинописног?текста ?содержат 12 таблиц ?45 рисунков. Библиографически?указател?содержит 233 наименований, из которы?148 иностранны?
МАТЕРИАЛ??МЕТОДЫ
Материал?исследован?. Анализ молеку?рн?генетических маркеров проводил?на материал?двух выборо? 206 больны?хронически?лимфолейкозо??307 челове?попу?ционного контро?. Общи?объе?исследуемо?выборк?составил 513 челове? ?выборк?больны??попу?ционного контро? включались индивидуум?русско?национальности, являющие? уроженцами Центрального Чернозем? России ?не имеющи?родств?межд?собо? Пациенты включались ?соответствующу?группу больны?только посл?установлен? диагноза заболевания, подтвержденног??помощь?клинически??лабораторн?инструментальных методо?обследован? [Воробьев ?? ?др., 2002]. Клиник?лабораторное обследование больны?проводилос?сотрудниками отделения гематологи?Белгородской областно?клиническо?больницы (заведующ? отделением ?Тикунова ??). Сред?206 больны?ХЛ?мужчин было 114 челове?(55,33%), женщин ?92 (44,67%). ?попу?ционно?выборк?(n=307) распределени?по полу было аналогичны? мужчин??162 челове?(51,95%), женщин??145 (48,05%) (?gt;0,05). Средни?возрас?больны?составил 65,46?,69 ле?(варьировал от 34 до 88 ле?, попу?ционно?выборк??62,20?,28 ле?(варьировал от 28 до 79 ле? (?gt;0,05). Таки?образо? группа попу?ционного контро? не отличалась от группы больны?ка?по полу, та??по возрасту.
Всем больны??хронически?лимфолейкозо??индивидуумам попу?ционного контро? проводилос?типировани?де?ти молеку?рн?генетических маркеров интерлейкино? интерлейкина 1?(-511C/T IL-1B), интерлейкина 1A (-889C/T IL-1), интерлейкина 4 (-590C/T IL-4), интерлейкина 5 (C-703T IL-5), интерлейкина 6 (-174G/C IL-6), интерлейкина 8 (-251??IL-8), интерлейкина 9 (T113M IL-9), интерлейкина 10 (-592C/A IL-10) ?антагонист?рецептор?интерлейкина 1 (VNTR IL-1Ra). Выбо?данных систем для исследован? обусловлен их важным патогенетическим значение?для ХЛ?[Bianchi S., 2010; Dhner H. et al., 2011; Антонеев??? ?др., 2007].
Материалом для исследован? послужил?венозн? кров??объеме 8-9 мл, взятая из локтевой вены пробанда. Забо?венозной кров?производил??пробирки ?консервантом, содержащим 0,5?раство?ЭДТА (рН=8.0).
Методы исследован?. Молеку?рн?генетические методы.
Выделени?геномной ДН?из периферической кров?проведен?методо?фенольно-хлороформной экстракции [Mathew, 1984].
Анализ всех локусо?осуществ?лся методо?полимеразной цепной реакци?(ПЦ? синтез?ДН? ПЦ?проводилас?на амплификаторах Терци?МС4?(ДН?технолог?) ?IQ5 (Bio-Rad) ?использованием ДН?полимеразы Thermus aquaticus производства фирм?Силек?М, олигонуклеотидны?праймеро??зондов, синтезированны?фирмой Синтол. Генотипировани?ДН?маркеров производилос?следующими методами: анализ полиморфизма длин амплифицируемы?фрагментов (VNTR IL-1Ra); анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (-511C/T IL-1B, -889C/T IL-1, -703C/T IL-5, T113M IL-9, -592C/A IL-10) продукто?ПЦ?амплификации специфически?участков генома ?использованием соответствующи?ферменто?рестрикции производства ОО?Сибэнзим (Новосибирс?. Визуализац? фореграм?осуществ?лась ?темном бокс??трансиллюминатором фирм?UVP (Швец?); анализ дискриминаци?аллеле?методо?TagMan зондов (-590C/T IL-4, -174G/C IL-6, -251??IL-8) на амплификатор?IQ5 c детектирующе?системой ?режиме реальног?времен? Для дискриминаци?аллеле?использовалась программ?лBio-Rad IQ5-Standart Edition?
Статистические методы. Формирование базы данных ?статистические расчет?осуществ?лись ?использованием программ?лSTATISTICA 6.0? Определени?фенотипических ?генных частот проводил?стандартными методами [Животовски???, 1983]. Для оценки соответств? наблюдаемого распределения генотипо?ожидаемому, исхо? из равновес? Хард?Вайнберг? использова?критерий χ2 [Вейр ?, 1995].
Ассоциации аллеле??генотипо?изученны?ДН?маркеров ?предрасположенностью ?хроническому лимфолейкозу, ?такж??качественным?признаками, характеризующими ег?клинически?особенност? оценивал??помощь?анализ?таблиц сопряженности 22 ?расчетом критер? 2 ?поправко?Йетс?на непрерывност??отношения шансов (ОR) ?95% доверительны?интервалом [Schlesselman J., 1982].
Пр?изучении ассоциации генетических полиморфизмо??патогенетическ?значимым?количественным?признаками ХЛ?вначал?оценивал?характер распределения этих признако??использованием критер? Шапиро-Уилк?[Ребров???, 2006]. Получено, чт?распределени?всех исследуемы?количественных признако?(уровен?лактатдегидрогеназ? содержание тромбоцито? лимфоцитов, содержание зрелых лимфоцитов ?миелограмм?пр?манифестации ХЛ??ег?течени? не соответствовал?закону нормальног?распределения ?поэтом?для их описан? применяли медиан?(M? ?интерквартильный размах (Q25-Q75), ?для сравнительного анализ??критерий Манн?Уитн?[Ребров???, 2006]. Исследование ассоциаций обще?выживаемости пациенто??полиморфными генетическим?маркерам?проведен?методо?множительных оценок Каплан-Майера. Вл?ни?генетических полиморфизмо?на общу?выживаемость больны?ХЛ?изучал??применение?регрессионно?модели Кокс? Анализ ассоциаций сочетани?генетических варианто??ХЛ?проведен ?помощь?программного обеспечения APSampler ( использующег?мето?Монт?Карл?марковским?це?ми ?байесовску?непараметрическу?статистику [Favorov A. V., et al., 2005]. Пр?проведении множественны?сравнени??цель?минимизаци?ошибок первог?рода, связанных ?получением ложноположительных результато?использовали поправку Бонферрони [Ребров???, 2006].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ?ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. Изучение ассоциаций генетических полиморфизмо?интерлейкино??формирование??патогенетическ?значимым?качественным?признаками хронического ?/?/мфолейкоза
Проведенны?сравнительны?анализ распределения молеку?рн?генетических маркеров интерлейкино?сред?больны?ХЛ??nbsp; ?попу?ционно?контроле показа?различ? межд?ними по генетическом?полиморфизму -590??IL-4 (Ри?1). Установлен?боле?высокая частот?алле? -590?IL-4 (24,51%) сред?больны?ХЛ?по сравнени??контрольно?группо?(18,24%, OR=1,45, 95%CI 1,06-1,99; 2=5,52, p=0,01). Таки?образо? генетический вариан?-590?IL-4 являет? фактором риск?развит? хронического лимфолейкоза. Литературные материал?свидетельствую? чт?полиморфиз? связанный ?замено?цитозина на тими??позици?590 локуса IL-4, обуславливае?снижение экспрессии гена, чт?може?приводит??уменьшению образования интерлейкина 4 [Дубако?? ? ?др., 2004; Шевченко ? ? ?др., 2009; Чайковский ??, ?др., 2009]. Пр?этом могу?снижаться противоопухолевы??противовоспалительны?эффект?интерлейкина 4 ?индивидуумов ?генетическим варианто?-590?IL-4, чт? ка?свидетельствую?результаты нашего исследован?, имее?важное этиопатогенетическое значение пр?ХЛ?
Ри?1. Распределени?алле? -590?IL-4 сред?больны?ХЛ???попу?ционно?контроле
Исследование особенностей генетической "конституци? больны?хронически?лимфолейкозо??различными стад?ми заболевания выявило следующе? Во-первых, сред?пациенто??0-I стад?ми заболевания выявлен?максимальн? концентрац? молеку?рн?генетических маркеров -590?IL-4 (35,37%) ?-590ТТ IL-4 (15,13%), чт?статистическ?достоверно превышае?показатели контрольно?группы (18,24%, χ2=22,22, ?0,001, OR=2,46, 95%Cl 1,66-3,64 ?2,61%, χ2=18,38, ?0,001, ?учетом поправки Бонферрони рcor=0,003, OR=6,65, 95%Cl 2,46-18,64, соответственно).
Во-вторых, отличительными особенностями генетических характеристи?пациенто?со II стадие?заболевания являет? наибольш? концентрац? аллеле?-889?IL-1?(30,92%) ?-703T IL-5 (35,33%) ?сравнени??контрольно?группо?(22,77%; 2=3,94, p=0,04, OR=1,51, 95%Cl 1,00-2,28; 26,41%, 2=4,29, ?0,03, OR=1,52, 95%Cl 1,02-2,26, соответственно). Частот?генотипа -590ТТ IL-4 сред?пациенто?со II стадие?заболевания равн?12,98%, чт??5 ра?превышае?аналогичны?показатель контрольно?группы (2,61% χ2=12,61, ?0,001, рcor=0,003, OR=5,57 95%Cl 1,94-16,21).
?третьи? выявлен?различ? ?распространённости алле? -703T IL-5 межд?больными ?III-IV стад?ми ХЛ??контрольно?группо? сред?больны?концентрац? данног?маркер?(41,18%) была боле?че??1,5 раза выше, че??контрольно?группе (26,41%, 2=5,90, p=0,01, OR=1,95, 95%Cl 1,12-3,36). Поскольк?этот полиморфиз?расположен ?промоторно?област?гена [Сазоно??? ?др, 2005], аллель -703?IL-5, не вл?я на структур?белк? може?существенн?изме?ть уровен?экспрессии гена интерлейкина 5 [Чайковский ??, ?др., 2009] ?таки?образо?вл?ть на течени?хронического лимфолейкоза [Никити??? ?др., 2008].
Изучение частот аллеле??генотипо?гено?интерлейкино?сред?пациенто??различными цитопеническим?осложнен?ми на момент обследован? (тромбоцитопения ?анем?) показало, чт?пациенты ?развившейся тромбоцитопенией на момент обследован? отличают? максимальной концентрацие?аллеле?IL-1Ra*1 (84,62%), -889?IL-1A (36,54%) ?генотипа -889ТТ IL-1A (19,24%) по сравнени??контроле?(70,31%, χ2=4,11, ?0,04, OR=2,32, 95%CI 1,02-5,46; 22,77%, χ2=4,26, ?0,03, OR=1,95, 95%CI 1,03-3,67; ?3,63%, χ2=9,44, ?0,003, рcor=0,009 OR=6,32, 95%CI 1,72-22,28, соответственно).
2. Молеку?рн?генетические маркер??клиник?лабораторные показатели больны?ХЛ?/
На следующе?этап?работы нами были рассмотрен?связи генетических полиморфизмо?интерлейкино??количественным?патогенетическ?значимым?признаками ХЛ? характеризующими клиник?лабораторный статус больны?(уровен?лактатдегидрогеназ?(ЛД?, уровен?тромбоцито? лимфоцитов, содержание зрелых лимфоцитов ?миелограмм?.
Установлен? чт??дебюте заболевания генетический маркер T113M IL-9 связа??уровне?ЛД??больны?ХЛ? Индивидуум??генотипо?113T?IL-9 имею?боле?высоко?содержание ЛД?(медиан??320,00 ед./? нижний квартиль ?234,00 ед./? верхни?квартиль ?405,00 ед./? по сравнени??пациентами ?генотипами 113ТМ ?113ММ IL-9 (медиан??201,50 ед./? интерквартильный размах ?167,00-303,00 ед./? ?0,007) (Ри?2). ?литературе имеются данные ?то? чт?аллель 113?IL-9 связа??усиление?экспрессии интерлейкина 9 [Vink A., et al., 1999], обладающег?провоспалительны?эффектом [Fischer M., et al., 2003; Калимуллин??? ?др., 2004], чт?може?обуславливат?неблагоприятное течени?ХЛ? одни?из маркеров которого являет? повышенный уровен?ЛД?[Воробьев ? ?, 2003].
Ри? 2. Ассоциации генетическог?полиморфизма ?13?IL-9 ?уровне?лактатдегидрогеназ??больны?ХЛ??дебюте заболевания
Полиморфны?генетический маркер -703C/T IL-5 ассоциирован ?уровне?тромбоцито??ЛД??дебюте ХЛ? ?пациенто??генотипами -703 CT ?-703ТТ IL-5 содержание тромбоцито?(медиан?200,00?09/? интерквартильный размах 154,00 ?09/?- 242,00?09/? меньше, ?уровен?лактатдегидрогеназ?(медиан??226,50 ед./? нижний квартиль ?178,50 ед./? верхни?квартиль ?322,50 ед./? выше по сравнени??пациентами ?генотипо?-703СС IL-5 (медиан?217,50?09/? нижний квартиль 178,00?09/? верхни?квартиль 270,00?09/? p=0,04 ?медиан??213,50 ед./? интерквартильный размах ?163,90-361,50 ед./? ?0,03, соответственно). Такж?установлен? чт?индивидуум??генотипами -703СТ ?-703ТТ IL-5 имею?боле?выраженный лимфоцитоз (медиан??71,00%, нижний квартиль ?53,00%, верхни?квартиль ?82,00%) по сравнени??пациентами ?генотипо?-703СС IL-5 (медиан??8,00%, интерквартильный размах ?46,00?4,00%, ?0,002) (Ри? 3).
Ри? 3. Ассоциации генетических варианто?локуса -703??IL-5 ?уровне?лимфоцитов ?больны?ХЛ?на момент обследован?
Уровен?лимфоцитов, %
Анализ вовлеченност?генетических варианто?локуса -251??IL-8 ?формирование клиник?лабораторных показателе?больны?ХЛ?показа? чт??пациенто??генотипами -251 АТ ?-251ТТ IL-8 содержание тромбоцито?(медиан??171?09/? интерквартильный размах ?125,00?09/?-217,00?09/? ниже че??индивидуумов ?генетическим варианто?-251АА IL-8 (медиан??186?09/? интерквартильный размах ?154?09/?-230?09/? (?0,02). Молеку?рн?генетический маркер -592C/A IL-10 ассоциирован ?уровне?тромбоцито??зрелых лимфоцитов ?миелограмм??больны?ХЛ? Индивидуум??генотипо?-592СС IL-10 отличают? боле?низким уровне?тромбоцито?(медиан??182,00?09/? нижний квартиль ?142,00?09/? верхни?квартиль ?240,00?09/? ?боле?высоки?содержание?зрелых лимфоцитов ?миелограмм?(медиан??40,00%, нижний квартиль ?21,00%, верхни?квартиль ?70,00%) по сравнени??больными, имеющими генетические варианты -592АC ?-592АА IL-10 (медиан?185,50?09/? интерквартильный размах 151,50 ?09/?-221,50?09/? ?0,02 ?медиан?21,00 %, интерквартильный размах 11,00-52,00 %, ?0,03).
Согласно данным литературы [Fellowes R. et al., 2000; Коненков ? ? ?др., 2006; Шевченко ? ? ?др., 2009] аллель -592?IL-10 связа?со снижение?экспрессии интерлейкина 10. Поэтом?повышенный уровен?зрелых лимфоцитов ?миелограмм??снижение уров? тромбоцито??пациенто??генотипо?-592СС IL-10, выявленны??наше?исследовании, могу?быть обусловлен?снижение?выработк?интерлейкина 10 ?соответственно уменьшение?ег?nbsp; противовоспалительного ?противоопухолевого эффектов [Eskdale J. et al., 1998; Guzowski D. et al., 2005; Кадагидз???, 2003].
Полученные ?работе данные свидетельствую??плейотропном действии молеку?рн?генетических маркеров -590??IL-4, -703??IL-5 ?-592C/A IL-10 пр?формировании патогенетическ?значимых качественных ?количественных признако?ХЛ? Та? генетический полиморфиз?-703??IL-5 ассоциирован ?формирование?II (OR=1,52, ?0,03) ?III-IV стадий ХЛ?(OR=1,95, ?0,01), ?такж??уровне?тромбоцито?(?0,04) ?ЛД?(?0,03) ?дебюте хронического лимфолейкоза ?содержание?лимфоцитов ?течени?заболевания (?0,002) (Ри?4).
Ри? 4. Ассоциации генетическог?полиморфизма -703??IL-5 ?качественным??количественным?патогенетическ?значимым?признаками ХЛ?/
Генетические варианты -590??IL-4 являют? фактором риск?формирован? хронического лимфолейкоза (OR=1,45, ?0,02), 0-I (OR=2,46, ?0,001) ?II стадий заболевания (OR=5,57, ?0,001), развит? токсически?симптомо??течени?заболевания (OR=1,65, ?0,02). Полиморфиз?-592C/A IL-10 связа??развитие?цитопенических осложнений ?течени?ХЛ?(OR=11,89, ?0,00003), ?такж?ассоциирован ?уровне?тромбоцито?(?0,03) ?зрелых лимфоцитов ?миелограмм?(?0,02) ?больны?ХЛ?
3. Анализ роли сочетани?гено?интерлейкино??формирован?/?/ предрасположенност?/ ?хроническому лимфолейкозу
?использованием биоинформатических подходов установлен?значим? роль генетических варианто?интерлейкино?-889C/T IL-1? -590C/T IL-4, -703C/T IL-5, -251??IL-8 ?формировании таки?патогенетическ?значимых признако?хронического лимфолейкоза ка?стадии заболевания по классификаци?K. Rai.
Получено, чт?сочетани?генотипа -590ТТ IL-4 ?аллеле?-703?IL-5 ассоциирован??формирование??0-I стадий хронического лимфолейкоза. ?15,11% больны?ХЛ??0-I стад?ми заболевания имеется данное сочетани?генетических маркеров, тогд?ка??контрольно?группе он?выявлен?лишь ?2,62% (ОR=6,70, 95%, CI 2,67-16,79, p=0,00004, pcor=0,03). Сочетани?двух генетических варианто?-889?IL-1??-590C IL-4, которо?наблюдается ?75,58% больны???91,47% попу?ционного контро?, являет? протективным фактором развит? 0-I стадий хронического лимфолейкоза (p=0,00005, pcor=0,03, ОR=0,23, 95% CI 0,11-0,46).
Выявлен?различ? ?концентрац??сочетани?генотипа -703СТ IL-5 ?аллеле?-251?IL-8 межд?группо?больны?ХЛ?со II стадие?заболевания ?попу?ционны?контроле? Эт?сочетани?встречается ?1,81 раза чаще сред?больны?ХЛ?(48,05%), че??попу?ционно?контроле (26,55%, p=0,00008, pcor=0,05, ОR=2,85, 95% CI 1,68-4,84).
Ка?свидетельствую?результаты ?да исследований [Johansson U. et al., 2005; Lu W. et al., 2005; Gonzalez D. еt al, 2011; ?др.] интерлейки?1 ? интерлейки?5, интерлейки?4 ?интерлейки?8 оказываю?действие на опухолевую пролиферацию, индукцию апоптоза ?аутоиммунные процессы, чт?може?имет?важное значение ?развитии хронического лимфолейкоза ?осложнений заболевания.
4. Гены-кандидат??выживаемость пациенто??ХЛ?
?помощь?монофакторного анализ?обще?выживаемости пациенто??ХЛ?(регрессионная модель Кокс? были выделены фактор? имеющи?неблагоприятное прогностическо?значение. Установлен? чт?наличи?аллеле?-590?IL-4 (?0,05), -174G IL-6 (?0,05) ?nbsp; развитие цитопенических осложнений ?течени?ХЛ?(?0,04) ухудшают общу?выживаемость больны?хронически?лимфолейкозо? Предполагая, чт?возможна взаимосвязь факторов, вл?ющих на общу?выживаемость пациенто??ХЛ? бы?проведен многофакторный регрессионны?анализ, которы?показа?аналогичны?данным монофакторного анализ?результаты: неблагоприятным?прогностическими факторам?являют? носительство аллеле?-590?IL-4 ?-174G IL-6, наличи?цитопенических осложнений ?течени?ХЛ?(?0,05). Механизм данных ассоциаций може?быть связа?со снижение?противоопухолево?защиты ?уменьшение?противовоспалительны?эффектов пр?генетических варианта?-590?IL-4 ?-174G IL-6 [Bushley A. W. et al., 2004; Шевченко ? ? ?др., 2009], чт??конечном итог?може?снижат?общу?выживаемость больны?ХЛ?[Hulkkonen J., et al., 2002; Кадагидз???, 2003].
ВЫВОДЫ
1. Генетические варианты интерлейкино?(VNTR IL-1Ra, -889C/T IL-1? -511C/T IL-1B, -590C/T IL-4, -703C/T IL-5, -174G/C IL-6, -251??IL-8, T113M IL-9, -592C/A IL-10) опреде?ют подверженность ?хроническому лимфолейкозу, ассоциирован??особенностями пр?влен? ?характером прогрессирован? заболевания.
2. Частот?алле? -590T IL-4 сред?больны?хронически?лимфолейкозо?(24,51%) ?1,3 раза выше, че??попу?ционно?контроле (18,24%). Сочетания генетических варианто?-590ТT IL-4 ?-703C IL-5 (OR=6,70) ?-889T IL-1??-590?IL-4 (OR=0,23) маркирую?0-I стадии заболевания, ?комбинац? -703CT IL-5 ?-251?IL-8 связана ?формирование?II стадии ХЛ?(OR=2,85).
3. Повышенный уровен?лактатдегидрогеназ??больны?ХЛ?ассоциирован ?генотипами -703CT, -703ТT IL-5 ?-113ТТ IL-9, высоко?содержание зрелых лимфоцитов ?миелограмм?связано ?-592C?IL-10 ?-703CT, -703ТT IL-5, ?уровен?тромбоцито?маркируется генетическим?полиморфизмами VNTR IL-1Ra, -889C/T IL-1?,-703C/T IL-5, -251??IL-8 ?-592C/A IL-10
4. Молеку?рн?генетические маркер?-590C/T IL-4, -703C/T IL-5 ?-592C/A IL-10 оказываю?плейотропное действие на формирование патогенетическ?значимых качественных ?количественных признако?хронического лимфолейкоза.
5. Носительство аллеле?-590?IL-4 ?-174G IL-6, наличи?цитопенических осложнений ?течени?заболевания являют? неблагоприятным?прогностическими факторам? снижающими общу?выживаемость больны?хронически?лимфолейкозо?
СПИСОК РАБО? ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕР?/?/ЦИ?
- Сиротина, ? ? ?различ???частотах аллеле?VNTR полиморфизма IL-1R?сред?больны?хронически?лимфолейкозо??попу?ционны?контроле?/ ? ? Сиротина, ? ? Тикунова // Актуальные вопрос?диагностик??лечения заболевани?внутренних органо?: материал?межрегио? науч.-прак? конф., Белгород, 17 де? 2009 ? / БеГ? Уп? здравоохранения ад? ? Белгород? Муници? учреждение здравоохранения го? больница ?2 ; по?ре? ? ? Ефремово? ?Белгород, 2009. ?? 53.
- Сиротина ? ? Генетический полиморфиз?интерлейкино??хронически?лимфолейко?/ ? ? Сиротина // Здоровье ?образовани??XXI веке. Инновационны?технологии ?биологии ?медицине : материал??междунар. конг?, Москва, 1-5 де? 2009 ? / Ро? ун-?дружбы народо?[?др.]. ??, 2009. ?? 945-946.
- Молеку?рн?генетические маркер?цитокино? попу?ционная распространенность ?связь ?мультифакториально?патологией / ? ? Калмыков? ? ? Тикунова, ?? ? Сиротина [?др.] // Вестни?Российског?университета дружбы народо? Се? Медицина. ?2009. ??4. ?C. 617-618.
- ?вопрос?об ассоциации полиморфизма T113M IL-9 ?хронически?лимфолейкозо?/ ? ? Руды? ? ? Сиротина, ? ? Ефремова [?др.] // Медицинская генетика. ?2010. ?Спец. вы? ?? 154. ?(Материал?VI съезда Ро? ?ва ме? генетико? Ростов-на-Дону, 14-18 мая 2010 ?).
- Сиротина, ? ? Изучение роли полиморфного маркер?-590 C/T IL-4 ?формировании хронического лимфолейкоза / ? ? Сиротина, ? ? Чурносов // Геронтологически?чтен? ?2010 : материал?III междунар. науч.-прак? конф., Белгород, 11-12 ноя? 2010 ? / БеГ? Геронтол. ?во РА? Белгор. от?ни? ?Белгород, 2010. ?? 15-16. ?(Геронтологически?журнал им. ? ? Купревич? ?2010. ??2).
- Сиротина, ? ? Результаты генотипирования IL-6 ?больны?хронически?лимфолейкозо?/ C. ? Сиротина // Актуальные вопрос?полиморбидно?патологи??клиник?внутренних болезней : материал?междунар. науч.-прак? конф., Белгород, 20 мая 2010 ? / БеГ? Де? здравоохранения ?со? защиты населения по Белгор. об? ; по?ре? ? ? Ефремово? ?Белгород, 2010. ?? 73-75.
- Сиротина, ? ? Молеку?рн?генетическое исследование хронического лимфолейкоза / ? ? Сиротина // Материал?IV международно?научно?конференци?молоды?ученых-медико? Курс? 25-26 февр. 2010 ? : ?3 ? / Курс? го? ме? ун-?; по?ре? ? ? Лазаренк? ?Курс? 2010. ?? 3. ?? 182-184.
- Сиротина, ? ? Результаты генотипирования IL-1??больны?хронически?лимфолейкозо?/ ? ? Сиротина // IX Всероссийская университетская научно-практическ? конференция молоды?ученых по медицине : сб. материалов / Ту? го? ун-?[?др.]. ?Тула, 2010. ?C. 112-113. ?(Вестни?новы?медицински?технологий. ?2010. ?? 17, ?2, прил.).
- Результаты генотипирования фактор?некроз?опухол?альф??интерлейкина-1??больны?хронически?лимфолейкозо?/ ? ? Тикунова, ? ? Сиротина // Вестни?РГМУ. ?2010. ??2. ?? 561.
- Сиротина, ? ? Роль генетическог?фактор?-251 A/T IL-8 ?формировании хронического лимфолейкоза / ? ? Сиротина // Медико-биологически?аспект?мультифакториально?патологи?: материал?II всерос. науч.-прак? конф. ?междунар. участием, Курс? 17-19 мая 2011 ? : сб. материалов / РАЕН, Цент?-Чернозем. цент?РАМН, КГМУ [?др.] ; от? ре? ? ? Иванов. ?Курс? 2011. ?? 100-101.
- Сиротина, ? ? Исследование гена-кандидат?IL-5 хронического лимфолейкоза / ? ? Сиротина // Вестни?РГМУ. ?2011. ЦС. 285-286.
- Исследование клинического значен? полиморфизма гена интерлейкина IL-10 (-592??IL-10) ?дебюте хронического лимфолейкоза / ? ? Сиротина, ?? Тикунова, ?? Прощае?// Вестни?РГМУ. ?2012. ЦС. 157-158.
- Сиротина ?? Изучение ассоциаций полиморфны?маркеров гено?интерлейкино??патогенетическ?значимым?качественным?признаками хронического лимфолейкоза / ?? Сиротина // Научны?ведомост?БеГ? Серия Медицина. Фармац?. ?2012. ЦВыпус?17, ? (123), ? 177-182.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ:
IL - интерлейки?/p>
VNTR - вариабельное числ?тандемны?повторов
ХЛ? - хронически?лимфолейко?/p>
Д? - лактатдегидрогеназ?/p>
Авторефераты по всем тема?/b> >>
Авторефераты по биологии