Книги по разным темам BulletinаofаMedicalаInternetаConferencesа(ISSNа22246150)а 598а а2012.аVolumeа2.аIssueа8а Общаяаиаклиническаяафармакологияа ID:а201208213A1545аОригинальная статья ШевченкоаО.В.,аРешетькоаО.В.,аКиселеваА.Р.*,аПосненковааО.М.*а Влияниеагенетическихаполиморфизмованааэффективностьалозартанаауабольныхаэссенциальнойа артериальнойагипертензиейа ГБОУаВПОаСаратовскийаГМУаим.аВ.И.аРазумовскогоаМинздравсоцразвитияаРоссии,акафедраафармакологииа *аФГБУаСаратовскийаНИИакардиологииаМинздравсоцразвитияаРоссииа Резюмеа Многофакторныйамолекулярногенетическийаанализапозволяетаопределитьарольагенетическихаполиморфизмовавапатогенезеа эссенциальнойаартериальнойагипертензииаианаметитьавыборафармакологическогоапрепаратаавазависимостиаотаактивностиа ферментовабиотрансформацииацитохромааР450.аПредставленыарезультатыаизученияаполиморфныхавариантовагеноваренин ангиотензинальдостероновойасистемыаиагеноваферментовацитохромааР450ауабольныхаартериальнойагипертензией.аПоказанаарольа определенныхагенетическихаполиморфизмоваваэффективностиаантигипертензивнойатерапии.а Ключевыеаслова:аартериальнаяагипертензия,агенетическийаполиморфизм,аДНКбиочипы.а Введениеа Персонализированнаяамедицина,аизучающаяагенетическиеаосновыаиндивидуальногоаответаанаалекарственныеапрепараты,ава настоящееавремяаинтенсивноаразвивается.аВаееаосновеалежатапредставленияаоагенетическомаполиморфизмеаЦазаменама нуклеотидовавамолекулеаДНК,акоторыеапоразномуавлияютанаафункциональнуюаактивностьасоответствующихагенопродуктов.а Благодаряаисследованиямагеномаачеловека,авпервыеапоявиласьавозможностьанеатолькоапроводитьаточнуюамолекулярнуюа диагностикуанаследственныхазаболеваний,аноаиаповышатьаэффективностьаихафармакотерапии.аБольшоеазначениеаватакиха исследованияхаимеетаизучениеаполиморфизмаагенов,апродуктыакоторыхаобеспечиваютаразличныеазвеньяаблизкоасопряженныха метаболическихацепей.аХорошуюамодельадляатакихаисследованийапредставляетаренинангиотензинальдостероноваяасистемаа (РААС).аБелковыеапродуктыаееагеноваиграютаключевуюарольаварегуляцииаартериальногоадавленияа(АД),аобеспечиваяаважнейшиеа компенсаторныеафизиологическиеапроцессыаваорганизме.а НакопленоамногоаданныхаоавлиянииаполиморфизмаагеновасемействаацитохромааР450анааиндивидуальнуюачувствительностьака антигипертензивнымапрепаратам,атакакакаименноаизоферментыаэтогоасемействааучаствуютаваметаболизмеаосновныхапрепаратов,а применяющихсяаванастоящееавремяадляалеченияаартериальнойагипертензииа(АГ).аЦитохромаР450а2C9а(CYP2C9)аЦаодинаизаглавныха ферментовабиотрансформацииаантагонистаарецептороваангиотензинааЦалозартана,аметаболизирующийаегоадоаактивногоа метаболитааЕXP3174.аПоаданнымарядвторов,аносительствоааллельныхавариантоваCYP2C9*2аиаCYP2C9*3а(лмедленныеа метаболизаторы)аможетаприводитьаканарушениюаобразованияауказанногоаметаболитаазаасчетасниженияаэнзиматическойа активностиаCYP2C9а[1]аиаснижениюаклиническогоаэффектаапрепарата.аПодобнаяаразницааответаакагипотензивнойатерапииапобудилаа интересаисследователейакафармакогенетическимаисследованиям.аТак,аканастоящемуавремениазаконченоапроспективноеа исследованиеаSILVHIAапоаизучениюавлиянияаполиморфизмаагеноваРААСанааответакатерапииаантагонистамиарецепторова ангиотензинаа[2].аНааоснованиианаучнойаинтерпретацииарезультатоваподобныхаработаиаданныхаклиникоинструментальныха исследованийастанетавозможнымаосуществлениеамаксимальноаэффективныхалечебнопрофилактическихамероприятийадляа пациента.а Цель:аПроанализироватьаэффективностьатерапииаартериальнойагипертензииалозартаномасаучетомаполиморфизмовагенова ангиотензиногенаа(AGT),агенаренинаа(REN),агеноварецептороваIIIатиповаангиотензинаа2а(AGTR1,аAGTR2),такжеагенаацитохромааР 4502С9а(CYP2C9).а Материалаиаметодыа ИзучалисьаобразцыаДНКа30абольныхаАГаобоихаполоварусскойанациональности,апроходящихаобследованиеавастационаре.а Среднийавозрастабольныхасоставила48,18,2алет,асредняяадлительностьазаболеванияаЦа6,93,6алет.аЗначенияаАДасоответствовалиа12а степениаАГапоарекомендациямаВНОКа2008аг.:асреднееасистолическоеаЦа169,672,04аммарт.аст.,адиастолическоеаЦа93,51,8аммарт.аст.а ДиагнозаАГаставилианааоснованиианеаменееачемадвукратныхаизмеренийаАДапоаметодуаН.С.Коротковаадоаиапослеалеченияа лозартаном.аПациентыаполучалиалозартанавадозеа50амг.авасуткиаватечениеа1амесяцаабезакомбинацийасадругимиагипотензивнымиа препаратами.а ДНКавыделялиаизалимфоцитовапериферическойакровиаобследованныхаметодомафенольнохлороформнойаэкстракции,а описаннымаM.B.аJohnsаиасоавт.а[3].аДляаизученияаполиморфизмовагеноваваработеаиспользовалсяановыйаэффективныйаметода генетическогоатестированияаЦаисследованиеанаабиологическихамикрочипах.аМетодикааразработанааваИнститутеамолекулярнойа биологииаим.аВ.А.ЭнгельгардтааРАНаиапредполагаетапредварительнуюамультиплекснуюаамплификациюафрагментоваДНКаса использованиемафлуоресцентноамеченыхапраймеров.аПолученныйапродуктадобавлялианаабиочип,апредставляющийасобойа подложкуаизастеклааилиапластика,анаакоторойаиммобилизированыамолекулызонды.аМолекулымишени,анаходящиесяава исследуемомаобразце,апоапринципуакомплементарностиасвязывалисьасамолекуламизондами.аКартинаагибридизацииапредставляета собойараспределениеафлюоресцентныхасигналов,амаксимальноаяркихаваточкахаспецифическогоасвязыванияазондааиамишени.аМетода позволяетавизуализироватьафлуоресцентныеасигналыанааматрицеабиочипаасапомощьюааппаратнопрограммногоакомплекса.а (ВозможностьаизученияаполиморфизмованаачипахапредоставленааОООаГеночипаг.Саратов).аБылиапроанализированыаотчетыа www.medconfer.comайаBulletinаofаMedicalаInternetаConferences,аБюллетеньамедицинскихаИнтернетконференцийа(ISSNа22246150)а 2012.аТома2.а№аисследованийаобразцоваДНКабольныхаАГанааКардиоабиочипе,акоторыйадаетаинформациюаоагенетическихаполиморфизмахарядаа генов,авовлеченныхаварегуляциюаАДа[4].а Обработкааполученныхарезультатовапроводиласьаметодамианепараметрическойастатистикиасаиспользованиемапрограммныха пакетова"MicrosoftаExcelа2003"аиа"Biostatistics"адляаWindowsа(версияа4.03).а Результатыа Средиаобследуемыхабольныханосителямигенотипаа(G83A)агенааRENаоказалисьа6ачеловека(20%),аGGгенотипааЦа16ачеловека (53,3%),аGАгенотипаа8ачеловека(26,7%).аТТ,аТСаиаССгенотипыа(Т235С)агенааAGTабылиавыявленыауа14а(46,6%),а12а(40%)аиа4а(13,4%)а человек,асоответственно.аСС,аАС,генотипыагенааAGTR1авыявленыауа2а(6,7%),а20а(66,7%)аиа8а(26,6%)ачеловек,асоответственно.,а СА,аССгенотипыагенааAGTR2аопределеныауа7а(23,3%),а13а(43,4%)аиа10а(33,3%)ачеловек,асоответственно.аПриаизученииагенетическиха полиморфизмовагенааCYP2C9араспределениеагетероаиагомозиготабылоаследующим:алмедленныеаметаболизаторыаЦа9ачеловека (30%),аизаниханосителиагетерозиготнойамутацииаСТа(C430T)аЦа5ачеловек,амутацииаАСа(A1075C)аЦа4ачеловека.аГомозиготапоа медленнымааллельнымавариантама(CYP2C9*2аиаCYP2C9*3)аваисследуемойагруппеаобнаруженоанеабыло.а СущественныеаразличияавагипотензивномаэффектеалозартанааобнаруженыауаносителейагенетическихаполиморфизмовагеноваRENа иаAGTR1.аУаобладателейагенотипАа(G83A)агенааRENасистолическоеаАДа(САД)аснижалосьавасреднеманаа3,2амм.рт.ст.,а диастолическоеаАДа(ДАД)аЦавасреднеманаа3,8амм.рт.ст.аУапациентовасагенотипамиаGGаиаGAа(G83A)аСАДаснижалосьавасреднеманаа 14,4амм.рт.ст.,аДАДаЦавасреднеманаа18,6амм.рт.ст.аУалицасагенотипамиаСС,такжеасагенотипамиаАСаиа(А1166С)агенааAGTR1а снижениеасреднихапоказателейаСАДасоставлялоа5,8амм.рт.ст.аиа21,7амм.рт.ст.,аДАДаЦа3,7амм.рт.ст.аиа18,2амм.рт.ст.асоответственно.аУа обладателейаразличныхагенетическихаполиморфизмовагеноваAGTаиаAGTR2астатистическиазначимыхаразличийавасреднихазначенияха САДаиаДАДапослеатерапииалозартаноманеаобнаружено.аЛицаасагенотипомаСТа(С430Т)агенааCYP2C9анеаимелиаклиническогоаэффектаа отатерапии,асредниеазначенияаСАДаиаДАДасталиавышеанаа4,2амм.рт.ст.аиа5,9амм.рт.ст.асоответственно,уапациентовасагенотипомаССа (С430Т)агенааCYP2C9асредниеазначенияаСАДаиаДАДаснизилисьанаа19,6амм.рт.ст.аиа21,5амм.рт.ст.асоответсвенно.аПациентыаса генотипомаАСа(А1075С)агенааCYP2C9аимелиаболееахудшийатерапевтическийаэффекта(снижениеаСАДанаа4,1.мм.рт.ст.аиаДАДанаа3,2а мм.рт.ст.),ачемалицаасагенотипома(снижениеаСАДанаа16,1.мм.рт.ст,аДАДанаа17,2амм.рт.ст.)а(таблица).а Таблица.аПолиморфизмыагеноваиагипотензивныйаэффектанаатерапиюалозартанома ГенаПолиморфизмаГенотипаиаколвоапациентов,ачел.аДинамикД,аммарт.ст.а АА6аСАД:а(3,2),аGG+GAа(14,4)*а RENаG83Aа GG+GA24аДАД:а(3,8),аGG+GAа(18,6)*а СС4аСАД:аССа(5,6),аТТ+ТСа(6,1)а AGTаT235Cа ТТ+ТС26аДАД:аССа(4,7),аТТ+ТСа(8,7)а СС2аСАД:аССа(5,8),аAC+(21,7)а AGTR1аA1166Cа AC+АА28аДАД:аССа(3,7),аAC+(18,2)а АА7аСАД:а(10,1),аСА+ССа(11,8)а AGTR2аC3123Aа СА+СС23аДАД:а(11,2),аСА+ССа(12,1)а CYP2C9*2аСТ5аСАД:аСТа(а+4,2),аССа(19,6)а (C430T)аСС25аДАД:аСТа(+5,9),аССа(21,5)а CYP2C9а CYP2C9*3аАС4аСАД:аАСа(4,1),а(16,1)*а (A1075C)26аДАД:аАСа(3,2),а(17,2)*а Примечание:а*ааpа<а0,05.аВастолбцеаДинамикДаваскобкахаоколоанаименованияагенотипаауказаныасредниеазначенияадинамикиаАДа(САДаилиа ДАД)ауаданныхапациентов.а Обсуждениеа Приаизученииараспределенияагенетическихаполиморфизмов,такжеагипотензивногоаответаанаафонеатерапииалозартаномауа больныхаАГасаносительствомаразличныхаполиморфныхамаркеровагеноваангиотензиногенаа(AGT),агенаренинаа(REN),агенова рецептороваIIIатиповаангиотензинаа2а(AGTR1,аAGTR2),такжеагенаацитохромааР4502С9а(CYP2C9),анамиабылиаполученыарезультаты,а дополняющиеаизвестныеаположенияапоабиотрансформацииаиаклиническойаэффективностиаизучаемогоапрепарата.а Оценивалисьавозможныеаособенностиагипотензивнойаэффективностиалозартанаасаучетомаисследуемыхаполиморфизмовагенова REN,аAGT,аAGTR1,аAGTR2аиаCYP2C9.аОтмечено,ачтоауабольныхаАГагипотензивнаяаэффективностьалозартанаанеаассоциироваласьасатема илиаинымаполиморфнымавариантомагеноваAGTаиаAGTR2.аУаносителейамутантныхааллелей,атакжеакакаианемутантныханаблюдалсяа одинаковоаположительныйаэффектанаатерапиюалозартаном,азначимыхаразличийадинамикиаАДаобнаруженоанеабыло.а УаносителейаразныхагенетическихаполиморфизмовагеноваRENаиаAGTR1аклиническийаэффектагипотензивнойатерапииазависелаота тогоаилиаиногоагенетическогоаполиморфизма.аНастоящееаисследованиеапоказало,ачтоалицаносителигенотипаа(G83A)агенааRENа имеютадостоверноа(p<0,05)аболееанизкийаклиническийаэффектанаатерапиюалозартаном,ачемапациентыасагенотипамиаGGаиаGA.а Подобнаяаклиническаяаэффективностьапрепаратаанаблюдаласьасредиагомоаиагетерозиготапоаполиморфизмуа(A1166C)агенааAGTR1:ауа носителейагенотипааССагипотензивныйаэффекталозартанаабыланиже,ачемауаносителейаАСаиаАAагенотипова(статистическуюа значимостьаразличийаоценитьаневозможноапоапричинеаоченьамалогоачислаанаблюденийавагруппеаССгенотипа).аУместноа предположить,ачтоавозможныеаизмененияаэкспрессииаиаструктурыаAGTR1азаасчетаполиморфизмааегоагенаамогутабытьапричастнымиа кавыраженностиарецепторногоавзаимодействияасалозартаном,аиакакарезультатаЦаособенностямафармакодинамическихавлияний.а Следуетаотметить,ачтоаканастоящемуавремениаданныеапоафармакогенетическимааспектамапримененияалозартанаауабольныхаАГа достаточноаразноречивы.а [ йаБюллетеньамедицинскихаИнтернетконференций,а2012.аwww.medconfer.com BulletinаofаMedicalаInternetаConferencesа(ISSNа22246150)а 600а а2012.аVolumeа2.аIssueа8а УалмедленныхаметаболизаторовапоаCYP2C9а(CYP2C9*2аиаCYP2C9*3)аотмечалсяанеоднозначныйагипотензивныйаэффекта лозартана.аНосителиагенотипааСТа(С430Т)а(5ачеловек)анеаимелиаклиническиазначимогоаэффектаанаалозартанаватечениеа7адней,ава последствииабылиаподобраныапрепаратыаизадругихафармакологическихагрупп.аУапациентов,аимеющихагенотипаАСа(А1075)а(4а человека)агипотензивныйаэффектабыланедостаточным,апрепарататакжеабылазаменен.аПоаимеющимсяавамировойалитературеа данным,аносительствоааллельныхавариантоваCYP2C9*2аиаCYP2C9*3аможетаприводитьаканарушениюаобразованияаактивногоа метаболитаалозартанааEXP3174азаасчетасниженияаактивностиаCYP2C9аиаснижениюафармакологическогоаэффектаа[1].аУапациентоваса такимагенотипоманеаследуетаожидатьахорошегоатерапевтическогоаэффектаалозартана,ачтоаиапоказалоанастоящееаисследование.а Заключениеа ВысокаяагипотензивнаяаактивностьалозартанаанеазависитаотаносительствааполиморфныхамаркероваТ235СаиаС3123АагеноваAGTаиа AGTR2асоответственно.аГенотипагенааREN,атакжеакакаиагенотипаССагенааAGTR1аассоциированыасанизкиматерапевтическима эффектомалозартана.аДляалицагетерозиготныханосителейааллельныхавариантоваCYP2C9*2аиаCYP2C9*3алозартананеаможетасчитатьсяа препаратомапервогоарядаадляалеченияаАГ.аВозможностьаизученияагенетическихамаркеров,авовлеченныхавапатогенезаэссенциальнойа АГ,такжеагенетическихаполиморфизмовагеноваизоферментовацитохромааР450,аявляетсяачрезвычайноаважнымашагоманаапутиака индивидуализированнойафармакотерапииаартериальнойагипертензии.а Литератураа 1. YasarаU.,аForslundBergengrenаC.,аTybringаG.аetаal.аPharmacokineticsаofаlosartanаandаitsаmetaboliteаE3174аinаrelationаtoаtheаCYP2C9аgenotypeа//аClin.а Pharmacol.аTher.аЦа2002.аЦаVol.71.аЦаP.а8998.а 2. LiljedahlаU.,аKarissonаJ.,аMelhusаH.,аKurlandаL.,аLinderssonаM.аetаal.аAаmicroarrayаminisequencingаsystemаforаpharmacogeneticаprofilingаofа antihypertensiveаdrugаresponseа//аPharmacogenetics.аЦа2003.аЦаVol.а13.аP.а717.а 3. ДНКнанобиочипыаваизученииагенетическойаосновыамультафакториальныхаианаследственныхазаболеванийауадетей.аБарановаА.А.а 4. JohnsаM.B.,аPaulusThomasаJ.E.аPurificationаofаhumanаgenomicаDNAаfromаwholeаbloodаusingаproteinaseаKаtreatmentаfollowedаbyаphenolchlorophormа extractionа//аAnalаBiochem.аЦа1989.аЦаVol.а180.аP.а276278.а 5.    Книги по разным темам